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目的：1.对课题组制备独一味总环烯醚萜苷的国家发明专利进行制备工艺再优化,获取高纯度总环烯醚萜苷；2.系统筛选独一味中具有润肠通便活性的组分,并进行相应活性成分的剂量相关性考察研究；3.初步探讨独一味总环烯醚萜苷的润肠通便作用机制；4.建立分离制备独一味中环烯醚萜单体的高效液相色谱方法,并结合PDA与质谱法对目标化合物进行定性鉴定,为课题组后续的单体润肠通便活性研究奠定基础。方法：1.高效液相结合紫外扫描分析前期制备总环烯醚萜苷中影响纯度的杂质特征,优化大孔树脂结合聚酰胺柱制备过程,获取高纯度产物。相同浓度制备工艺优化前后产品经紫外及高效液相分离对照,分析优化结果；2.采用复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型,以麻仁丸为阳性药物,炭末为标记物,通过观察小鼠首次排黑便时间、6h排黑便次数、小肠推进率等,对独一味水提取物(AELR)及总黄酮(P1)、总环烯醚萜苷(P2)、大极性部位(P3)进行润肠通便活性筛选,相同方法对活性成分进行剂量相关性考察；3.随机选取10只雌性大鼠为空白组,剩余大鼠以复方地芬诺酯灌胃造模,模型成功后以炭末为标记观察并测定各大鼠首次排黑粪便时间筛选便秘大鼠。并将其随机分为模型自然恢复组、麻仁丸阳性对照组、及P2低、中、高组；期间观察各项指标变化,组间差异明显时解剖取材测定5-HT、AQP3表达；4.系统分离分析自制独一味总环烯醚萜苷组分,收集高效液相色谱流出液,冷冻干燥得到目标化合物,采用RP-HPLC测定相应化合物纯度,PDA、MS结果及对比相关文献资料定性鉴定。结果：1.制备工艺优化后其总环烯醚萜苷含量为90.60%,产率为16.70%,转移率为74.72%,含量提升21.54%；2. 成功获得小鼠便秘模型,总环烯醚萜能显著缩短便秘小鼠首次黑便时间,增加排黑便次数及便秘小鼠小肠推进率。水提取物因含有环烯醚萜苷类成分,显示出较弱的治疗作用,总黄酮及大极性部位未显示出润肠通便效果。且随着环烯醚萜苷剂量增加(0.05-0.30 g/kg.bw),治疗效果趋于明显,0.30g/kg.bw剂量的总环烯醚萜苷对便秘小鼠的治疗效果类似于1.0 g/kg.bw麻仁丸,给药期间实验动物无明显不良反应发生;3.便秘大鼠结肠内的5-HT含量与空白组相比显著降低(P<0.01),各治疗组结肠5-HT含量较模型组明显增加,P2-L治疗组与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05),P2-N、P2-H剂量组及阳性组(MRW)与模型组相比具有显著性差异(P<0.01),且与模型组相比MRW及P2剂量组均可减少便秘大鼠结肠粘膜AQP3的表达量;4.高效液相色谱分离制备,结合PDA、MS结果及对比相关文献资料最终确定9种环烯醚萜苷单体分别为Phlorigidoside C, Schismoside, Sesamoside, Shanzhiside methylester,6-0-Acetylshanzhiside methylester, Phloyoside Ⅱ, Penstemoside, Loganin,8-0-Acetylhanzhiside methylester。1.本次优化过程简单,易于实现,含量提升结果显著；2.独一味中总环烯醚萜苷为润肠通便活性成份,通便效果显著,可作为纯天然治疗便秘的药物开发；3.独一味环烯醚萜苷能够通过提高结肠5-HT含量、减少结肠粘膜AQP3的表达量治疗STC型便秘,治疗效果较为理想；4.本实验建立的单体制备方法操作简单,可用于独一味中9种环烯醚萜的定性分析和单体制备。