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目的:前期研究结果显示,在含双微体的人原发性神经外胚层瘤细胞SK-PN-DW中,癌基因C-MYC高扩增。本研究目的为探讨SK-PN-DW细胞中C-MYC在肿瘤发生、发展中的作用机制及对双微体形成的影响。
方法:本研究利用RNA干涉技术,构建针对人C-MYC基因的基因沉默表达载体,包装成病毒后稳定转染SK-PN-DW细胞。RT-PCR和Western blot检测基因沉默后细胞中C-MYC基因RNA和蛋白的表达水平后,进行中期核型双微体计数、细胞的增殖、周期和凋亡等细胞功能学实验。
结果:SK-PN-DW细胞中C-MYC基因沉默后的双微体数目无明显改变;同时细胞增殖能力降低、细胞周期发生G1期阻滞;另外,目的基因沉默后,SK-PN-DW细胞凋亡减少。
结论:人原发性神经外胚层瘤细胞SK-PN-DW中,C-MYC基因扩增导致的目的蛋白过表达,对双微体的形成没有影响,但是可以通过诱导细胞发生细胞周期阻滞抑制细胞的增殖,同时拮抗由于C-MYC表达下降而引起的细胞凋亡作用。