丹参酮ⅡA磺酸钠对SD大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

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目的:观察丹参酮IIA磺酸钠(Tanshinone IIA sodium sulfonate,TSS)对雄性(Sprague-Dawley,SD)大鼠心肌缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion,I/R)的影响,并初步探讨其作用机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支30分钟,结扎的心肌组织颜色变灰标志着结扎成功,再灌注24小时建立缺血再灌注模型,将存活的SD大鼠随机分为对照组(sham组,n=10)、缺血再灌注组(I/R组,n=10)、丹参酮IIA磺酸钠低剂量组(TSS-L组,n=10)、丹参酮IIA磺酸钠中剂量组(TSS-M组,n=9)、丹参酮IIA磺酸钠高剂量组(TSS-H组,n=9)。MAP心脏功能分析系统检测血流动力学指标,TTC染色法检测大鼠心肌梗死面积,western blot法检测心肌Bcl-2、Bax、Caspase-3、Lc3B/Lc3A、Beclin-1及高迁移率蛋白B1(high-mobility group box1,HMGB1)的表达。多组间比较采用ANOVA分析,两组间比较采用独立样本t检验,P<0.05表示有显著性差异。结果:I/R组较sham组心功能舒缩参数明显降低,TSS预处理使其显著升高(F=98.329,P<0.05),但DAP、Pmin没有显著性差异(P>0.05)。TSS预处理组心肌梗死百分比显著低于I/R组(F=428.684,P<0.05)。与sham组相比,I/R组显著增加了Caspase-3表达(t=-5.091,P<0.01);TSS预处理组能够明显下调Caspase-3蛋白表达(F=16.113,P<0.01)。I/R组Bax表达亦明显升高(t=-6.521,P<0.01),TSS能够抑制Bax蛋白表达(F=12.823,P<0.01)。I/R组降低了Bcl-2蛋白的表达水平(t=0.946,P<0.05),不同剂量的TSS预处理均使Bcl-2表达水平升高(F=22.921,P<0.01)。I/R组Bcl-2/Bax较sham组比值降低(F=37.253,P<0.05);TSS预处理使其明显升高(F=18.297,P<0.05)。自噬相关蛋白Beclin-1与Lc3B/Lc3A有相似的变化趋势,I/R组Beclin-1蛋白及Lc3B/Lc3A水平低于sham组(t=4.886,t=5.785,P<0.05),TSS预处理能够上调Beclin-1表达与Lc3B/Lc3A比值(F=48.809,F=11.475,P<0.05)。与sham组比较HMGB1表达明显增高(t=8.591,P<0.05),TSS预处理组较I/R组减少了HMGB1的表达(F=25.338,P<0.01)。结论:(1)丹参酮IIA磺酸钠对SD大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且在一定剂量范围内具有正相关关系。(2)丹参酮IIA磺酸钠对SD大鼠心肌缺血再灌注损伤的这种保护作用,其作用机制可能与抑制细胞凋亡,激活细胞自噬有关。
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