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目的:本实验构建针对人XIAP基因的小干扰RNA表达载体,并转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,观察其对XIAP mRNA表达及对Hela细胞凋亡和周期的影响。研究不仅为针对XIAP基因的RNA干扰提供新的有效的作用靶位,而且为体内表达载体介导的RNA干扰作为一种有效的基因沉默技术的应用提供新的实验依据,为针对凋亡抑制基因XIAP的宫颈癌基因治疗提供新的途径,同时也对RNA干扰技术在肿瘤研究和基因治疗方面应用的可能性进行有益的探索。方法:研究对象为人宫颈癌HeLa细胞株。（1）构建针对XIAP的表达载体pGPU6-GFP-XIAP-shRNA。（2）培养HeLa细胞通过脂质体转染进入细胞,并设置空白对照组（Blank）、转染试剂组（mock）、阴性组（NC）、干扰组（pGPU6-GFP-XIAP-shRNA）组。（3）实时荧光定量PCR检测各组XIAP mRNA的相对表达量。（4）同时应用流式细胞技术检测细胞凋亡率和PI单染检测细胞周期。结果:（1）pGPU6-GFP-XIAP-shRNA质粒进行酶切鉴定,同时测序鉴定也证实目的序列已准确插入到预计位点,重组质粒构建成功。（2）实时荧光定量PCR结果显示pGPU6-GFP-XIAP-shRNA转染48h和72h后HeLa细胞中XIAP mRNA的表达量下降27%和51%,与空白组相比有差异（P＜0.05）。而且在48h至72h期间,干扰片段沉默效应呈趋势增强,XIAP基因mRNA的表达量呈递减趋势。（3）流式细胞仪检测发现,在48h和72h XIAP-shRNA组细胞凋亡率（31.60±1.29%和37.43±1.94%）与Blank对照组（1.58±1.34%和2.12±1.44%）、mock组（4.19±1.64%和4.87±1.50%）、NC组（4.58±1.63%和5.15±1.82%）相比细胞凋亡率显著增加（P＜0.05）。（4）PI单染流式细胞仪检测细胞周期结果证实转染XIAP-shRNA组的HeLa细胞周期发生改变,转染后G0/G1期细胞显著增加,与Blank组相比出现G0/G1期阻滞现象,G0/G1期升高而S期下降（P＜0.05）;结论:（1）针对XIAP基因设计合成的shRNA干扰片段准确地克隆到pGPU6-GFP表达载体中,说明表达载体构建成功。（2）应用脂质体转染试剂能高效地将重组载体转染入HeLa细胞,从而保证了重组载体在细胞内高效地表达。（3）针对XIAP基因shRNA的能够在HeLa中成功发挥特异、有效的基因沉默作用。可明显降低宫颈癌HeLa细胞XIAP基因mRNA的表达。（4）针对XIAP基因shRNA可将HeLa细胞周期阻滞于G0/G1期,诱导HeLa细胞产生凋亡。说明XIAP基因对于维持正常的细胞周期和抑制肿瘤细胞的凋亡发挥着重要作用。本实验构建的重组质粒显著抑制XIAP mRNA表达从而抑制细胞生长,诱导细胞凋亡,因此这一技术的应用将是一种可行的肿瘤基因治疗策略。