第一部分：临床研究部分下咽鳞癌不同方案治疗临床分析 目的：分析下咽鳞癌不同方案临床治疗结果，探讨不同方案对预后的影响。方法：回顾分析187例下咽鳞癌临床资料，将病例分为综合治疗组，单纯手术组，单纯放疗组。比较三组的生存率，复发率以及分析喉功能保留与否对生存率的影响。 结果：5年总体生存率44.9％。Ⅰ、Ⅱ期生存率(85.7％)高于Ⅲ、Ⅳ期(37.1％)(P＜0.01)。综合治疗组，单纯手术组，单纯放疗组的5年总体生存率分别为60.8％，38.7％，22.0％。综合治疗组明显高于单纯手术治疗组和单纯放射治疗组(P＜0.05)。Ⅲ、Ⅳ期5年生存率分别为综合治疗75.7％和45.3％，单纯手术治疗为33.3％和17.6％，单纯放射治疗为16.7％和7.7％。综合治疗生存率明显高于单纯手术治疗和单纯放射治疗(P＜0.05)。总体复发率44.9％。Ⅲ、Ⅳ期病例复发率为48.4％，明显高于Ⅰ、Ⅱ期的25％(P＜0.05)。各治疗组中，Ⅲ、Ⅳ期病例的5年复发率分别为单纯手术治疗60.9％，单纯放射治疗80％，综合治疗26.7％。单纯手术治疗和单纯放射治疗的复发率明显高于综合治疗(P＜0.01)。Ⅲ、Ⅳ期病例中，喉功能保留和不保留患者的5年生存率分别为72.4％，46.2％和60.0％，36.8％.两者相比差异无显著性(P＞0.05)。 结论：下咽鳞癌综合治疗优于单一治疗。 第二部分：临床实验研究部分 Ⅰ.不同化疗敏感性的下咽鳞癌差异基因表达谱的筛选 目的：筛选化疗敏感性不同的下咽鳞癌的差异基因表达谱。分析基因功能和信号途径的变化，为临床评估化疗敏感性提供潜在基因指标。 方法：选取诱导化疗敏感和不敏感的下咽鳞癌各4例，分别提取mRNA，依次体外反转录为cDNA和cRNA，不同生物素标记和片断化后制成cRNA探针，与人类基因组芯片杂交，对杂交信号扫描并进行归一化处理后，使用GCOS4.0统计软件分析。以SignalLogRatio≥1和changeP-value≤0.05作为筛选差异表达基因的标准，根据生物学过程和功能途径对差异基因进行分类。 结果：筛选差异表达基因119条，其中上调基因65条，下调基因54条。差异表达基因包括信号传导，细胞周期，细胞凋亡，代谢酶类，细胞因子等，化疗敏感组中EGFR，TGF-β和TNFR等细胞信号通路异常。 结论：化疗敏感性不同的下咽鳞癌其基因表达谱不同。 Ⅱ.差异基因与下咽鳞癌化疗敏感性的相关性 目的：筛选差异性显著和同一功能信号途径的基因，分析其表达水平与化疗敏感性的关系。确定预测化疗敏感性的标志基因。 方法：选择SignalLogRatio≥1.0和同一功能信号途径的基因(CD1，FAS，STAT3)作为标志基因。免疫组化方法检测CD1，FAS和STAT3基因在不同化疗敏感性下咽鳞癌中的表达，以阳性细胞数超过25％为标志基因表达阳性。比较其阳性率与化疗敏感性的相关性。结果以列联表卡方进行检验分析。 结果：CD1,FAS和STAT3的阳性表达率分别为58.3％(7/12)，50％(6/12)和50％(6/12)。化疗敏感和不敏感的下咽鳞癌中，CD1的阳性表达率分别为100％(6/6)，16.7％(1/6)，FAS和STAT3在化疗敏感组中阳性表达率均为100％(6/6)，在化疗不敏感组中均为阴性。两组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论：信号传导(STAT3等)，细胞周期(CD1等)，代谢酶类(GSP1等)，细胞基质(MMP2等)等基因的高表达与化疗敏感性有关。 Ⅲ.差异基因表达谱对下咽鳞癌化疗敏感性的预测作用 目的：回顾分析标志基因在化疗敏感性不同的下咽鳞癌中的表达，比较单一基因和联合标志基因(3条以上基因)预测下咽鳞癌化疗敏感性的准确性。探讨基因谱对化疗敏感性的预测作用。 方法：收集1996年1月～2003年12月间在我院治疗的T3T4期，诱导化疗2程以上的下咽鳞癌病例的治疗前标本，免疫组化方法检测CD1，FAS，STAT3基因标志物和联合(2条以上)标志基因在不同化疗敏感性的下咽鳞癌中的表达。Logistic回归模型分析单一基因和联合基因标志物对下咽鳞癌化疗敏感性的预测率。 结果：41例标本中，CD1，FAS，STAT3和联合标志基因的阳性表达率分别为41.5％(17/41)，36.6％(16/41)，31.7％(13/41)和41.5％(17/41)。在化疗敏感和不敏感下咽鳞癌中，阳性表达率分别为57.9％(11/19)，27.3％(6/22)；57.9％(11/19)，22.7％(5/22)；47.4％(9/19)，18.2％(4/22)和78.9％(15/19)，9.1％(2/22)，差异均有统计学意义(P＜0.05)，对化疗敏感性的预测准确率分别为FAS68.3％(P=0.025)，联合标志基因为85.4％(P=0.0001)。 结论：使用多基因估计下咽鳞癌化疗敏感性的准确率(85.4％)高于单一基因(68.3％)。