超声联合荧光原位杂交技术诊断兔膝关节假体感染

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第一章:超声辐照对表皮葡萄球菌活性影响的实验研究  目的:探讨超声辐照对表皮葡萄球菌ATCC35984活性的影响,为超声联合荧光原位杂交技术诊断兔关节假体感染提供依据。  方法:将菌液分为空白组、1.4W/cm2辐照组、2.0W/cm2辐照组,分别以0W/cm2、1.4W/cm2、2.0W/cm2声强,间歇式1:2,辐照2min。然后继续培养,48h观察细菌生长情况。  结果:随着声强的增加,培养板上繁殖的菌落数明显增多、密集。  结论:在声强范围内0~2W/cm2,超声辐照并不对细菌的活性产生抑制作用,且随着声强的增加,可有效促进细菌繁殖,增加菌落数。  第二章:超声辐照对局部软组织影响的实验研究  目的:探讨超声辐照部位存在膝关节假体的情况下,使用超声波治疗仪辐照是否会产生高热,导致局部软组织损伤。  方法:建立膝关节假体感染的动物模型,并使用超声波治疗仪辐照假体部位,使用热成像仪记录并比较在超声辐照前、辐照完毕瞬间局部的温度变化。  结果:本实验建立的膝关节假体感染动物模型能较好的模拟临床慢性低毒性的细菌感染。在植入膝关节假体的部位使用超声辐照,局部产生的温度变化不超过1℃,超声辐照前的平均温度是35.664℃,超声辐照完瞬间的平均温度是36.192℃,F=2.175 Sig=0.158P>0.05,统计学无差异。  结论:本实验结果显示,使用超声波声强1.4W/cm2,间歇式1:2,辐照2min,即使辐照部位存在膝关节假体,局部产生的热量变化小于1℃,产生的热量不足以使局部组织损伤。  第三章:超声联合荧光原位杂交技术诊断兔膝关节假体感染  目的:联合使用超声与荧光原位杂交技术(FISH)诊断兔膝关节假体感染。  方法:  1)建立新西兰白兔膝关节假体感染模型,随机分为超声处理组、对照组。超声组予以声强为1.4W/cm2辐照2min,对照组不予以超声处理。  2)采用FISH检测膝关节液是否存在细菌。采用扫描电镜(SEM)观察聚乙烯垫圈(UHMWPEs)表面生物膜变化。对垫圈、不锈钢螺钉表面细菌进行计数。  结果:  1) FISH检测:超声组FISH检出率达100%,对照组检出率只有60%。  2)扫描电镜观察:超声组垫圈上生物膜稀疏,残留的细菌少;对照组上生物膜密集,可见表皮葡萄球菌包裹在内。  3)假体表面细菌计数:超声组垫圈上细菌计数平均36(25,51),对照组垫圈上细菌计数平均3900(2525,4750),P<0.05;超声组螺钉上的细菌计数平均48(30,58),对照组不锈钢螺钉上的细菌计数平均54000(14200,203500),P<0.05。  结论:使用超声能破坏表皮葡萄球菌生物膜,使细菌脱落,此时抽取关节液使用FISH检测,有利于早期快速诊断兔膝关节假体感染。
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