酱油是我国传统的调味品之一，营养全面而丰富，沪酿3.042米曲霉是酱油酿造中应用最广泛的菌种，在制曲过程中所分泌的蛋白酶多为中性和碱性蛋白酶，酸性蛋白酶活力很弱，导致原料蛋白质利用率不高，酱油鲜味不足，黑曲霉可以分泌大量的酸性蛋白酶，但如果混合菌种发酵，黑色孢子飞扬，污染环境，影响产品色泽和质量。因此，通过改良菌种，提高酸性蛋白酶的表达是酱油实际生产中一个具有很重要意义的课题。　　 本研究首先利用紫外线和氯酸钾复合诱变，筛选到沪酿3.042米曲霉硝酸盐营养缺陷型菌株来作为表达载体转化的宿主，同时又研究了吡啶(代噻唑)硫胺素对米曲霉的生长影响，结果表明，该药物可以很大程度上抑制米曲霉的生长，可以利用抗药性菌株的基因ptrA构建野生型米曲霉转化体系；然后从黑曲霉中提取全mRNA，通过RT-PCR克隆出黑曲霉酸性蛋白酶基因，并用强启动子淀粉酶基因的启动子作为启动子，以糖苷酶基因的终止子作为终止子构建米曲霉表达载体，载体的构建基于gateway cloung技术，针对不同的宿主菌，分别在pUC119和pPTR I的基础上构建了载体pUC-APA和pPTR-APA，载体pUC-APA可以和带有硝酸盐还原酶基因的载体施行共转化沪酿3.042米曲霉硝酸盐营养缺陷株(niaD-)，载体pPTR-APA可以以吡啶(代噻唑)硫胺素作为显性标记直接转化野生型米曲霉。　　 本论文对米曲霉基因工程菌的改造进行了初步研究，包括营养缺陷型曲霉作为受体菌的基因转化系统的开发和野生型曲霉作为受体菌的基因转化系统的开发，对米曲霉工程菌的构建奠定了基础。