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研究目的与内容:NMO(Neuromyelitis Optica,NMO)在2004年以前一直被认为是多发硬化(Multiple Sclerosis,MS)的一种亚型,直到水通道蛋白 4(Aquaporin 4,AQP4)抗体发现促使视神经脊髓炎作为一个独立的疾病从多发性硬化中分离出来。血清中存在AQP4抗体与视神经脊髓炎的发病和临床诊断密切相关,尽管研究者已经不断改进AQP4抗体的检测方法,并且进行了多中心、大样本量的检测,仍然有一部分患者的AQP4抗体是阴性的。那么在这些阴性的患者中是否存在其它与疾病相关的抗体,是否存在其它的免疫机制目前尚不清楚。髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein,MOG)被认为是 MS 中最有可能的致病抗原,可以在实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)中同时诱导出致病性髓鞘自身抗体和T细胞反应。已有报道视神经脊髓炎患者中存在MOG抗体,但其存在是否提示独特的临床特征和表型尚不清楚。为解决上述问题,我们在临床开展了对视神经脊髓炎疾病谱系疾病患者的MOG抗体筛查,并且依据患者的血清抗体状态对患者进行分组并比较了 MOG抗体阳性患者、AQP4抗体阳性患者以及双阳性患者的临床特征。AQP4抗体和MOG抗体这两种自身免疫性抗体的发现提示我们体液免疫过程在NMO发病机制中的重要作用。然而抗原特异性的B细胞活化并产生抗体多依赖于辅助性T细胞的协助,在辅助T细胞研究领域,近年来滤泡辅助T淋巴细胞(follicular helper T cell,Tfh)逐渐成为热点。我们也首次对视神经脊髓炎疾病谱系疾病患者进行了外周血中Tfh细胞的监测,目的是来探究Tfh细胞与疾病之间的联系。研究方法:围绕着MOG抗体,通过回顾性研究我们从两个临床中心,入组了 125位NMOSD病人,91位复发缓解型多发硬化病人,45位健康对照,45位其它神经系统疾病(17位急性脑梗死,10位癫痫,5位脑炎,5位重症肌无力,3位格林巴利综合征,5位副肿瘤综合征患者)。通过病人AQP4抗体和MOG抗体的检测结果对病人进行分组,进而比较不同组别病人的临床、MRI、OCT、实验室检查特征,进一步探讨MOG抗体可能引起的临床表型的变化。围绕着Tfh细胞,通过回顾性研究我们入组了 35位NMOSD病人(24人为缓解期,11人为复发期),20位MS病人(10人为缓解期,10人为复发期)和20位健康对照。随访了 6位对糖皮质激素治疗反应有效NMOSD病人,通过流式细胞分析方法和ELISA法,比较在不同疾病的不同时期,Tfh细胞及其相关细胞因子的变化情况。进一步论证Tfh细胞和NMOSD疾病活动性之间的联系。研究结果:1、(AQP4+MOG)抗体阳性的病人多为多向病程[复发比例(AQP4+MOG)抗体阳性组vs AQP4抗体阳性组vs MOG抗体阳性,100%vs 96%vs 57%,P<0.0001];(AQP4+MOG)抗体阳性的病人年复发率显著高于另外两组[(AQP4+MOG)抗体阳性组vs AQP4抗体阳性组vs MOG抗体阳性组,1.7±0.4 vs 1.0 ±0.1 vs 1.2±0.2,P=0.0431)];残疾程度显著高于另外两组[(AQP4+MOG)抗体阳性组vs AQP4抗体阳性组的病人,6.8±0.5 vs 4.3±0.6,P=0.0161;AQP4抗体阳性组 vs MOG 抗体阳性组,4.3±0.6 vs 1.5±0.4,P=0.0083)];在头部 MRI上,出现MS样脑部病灶,在脊髓MRI上,出现多发病灶,伴有严重水肿;在眼部OCT和MRI上,出现显著变薄的视网膜神经纤维层和严重的视神经萎缩。2、MOG抗体单阳性病人多为单向病程;残疾程度轻;在头MRI上,出现侧脑室周围病灶;在脊髓MRI上,出现多发病灶,伴轻度的水肿;在眼部OCT和MRI上,几乎不出现视网膜和视神经变化。3、Tfh细胞在NMOSD组水平显著高于健康对照与MS组(7.05±1.97%vs 5.22±1.46%,P=0.0008;NMOSD vs HC=7.05±1.97%vs 5.14±1.33%,P=0.0005);NMOSD组的IL-6和IL-21水平显著高于MS组和HC组。4、Tfh细胞在NMOSD组中复发期显著高于缓解期(Relapsing vs Remitting=8.56±1.82%vs 6.35±1.64%,P=0.0034;Remitting vs HC 6.35±1.64%vs 5.13±1.33%P=0.0196);复发期 NMOSD 组的 IL-6、IL-21、TNF-α、IL-17水平显著高于缓解期和健康对照组。5、糖皮质激素治疗后能够显著降低NMOSD病入Tfh细胞及其相关因子水平(Before vs After P=0.0151)。血清中 IL-21、IL-6、TNF-α 和 IL-17 的水平在激素治疗后明显下降。6、AQP4抗体滴度与Tfh细胞计数无明显相关性(P=0.1427)。研究结论:MOG抗体和AQP4抗体同时存在可显著加重患者病情。MOG抗体单阳性和(AQP4+MOG)抗体阳性病人的不同疾病特点,揭示了 NMOSD病人体内可能存在不同的致病机制,也提示我们进行MOG抗体的检测有一定的临床意义。Tfh细胞在NMOSD病人组中显著升高并且随着病情变化而改变,提示Tfh与NMOSD疾病活动性密切相关,是否可以作为疾病活动的生物标记物尚需大样本的临床试验验证。