防风中有效成分的提取及对实验性肝损伤保护作用的研究

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传统中药防风为伞形科多年生草本植物防风Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk的干燥根。防风是我国重要的传统中药的组成成员之一,始载于《神农本草经》,列为上品,具有几千年悠久的药用历史。近年来国内外文献对防风色原酮类成分的药理作用报道较多,说明了其具有明显的解热、镇痛、抗炎、抗肿瘤、增强免疫及降压作用。鉴于防风中色原酮类成分良好的药理作用,其在复方制剂中及临床用药上的使用量将会逐渐上升,本文从这一趋势出发,对防风不同部位总色原酮的含量及总色原酮分离纯化进行了研究。以升麻素苷、升麻素、5-0-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷的含量为考察指标,通过HPLC法对我们所采摘的防风不同部位根、茎、叶、花、果实所含色原酮的总量进行了测定,结果显示:防风根部总色原酮的含量远超过茎、叶、花、果实,这可能与采摘地点、时间等条件有很大的关系,以我们的测定为依据,我们首选根部作为我们进一步提取分离色原酮类成分的有效部位。同样以升麻素苷、升麻素、5-0-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷的含量为考察指标,进行了5种大孔吸附树脂工艺参数的筛选,成功的运用了AB-8大孔吸附树脂技术优化了防风色原酮类化合物的分离纯化工艺,为防风色原酮的分离纯化提供理论参考。最优化条件为:上样6h后达到最大吸附量18.6mg/g,30%体积分数的乙醇溶液可以使防风色原酮类成分大部分从树脂床上解吸附,此四种成分收率较高。选用的AB-8大孔吸附树脂对防风色原酮吸附性能好,完全适合工业化富集分离纯化防风色原酮类成分。植物中的主要成分有部分不是直接入血吸收的成分,它们会在肠细菌酶的作用下发生转化再被入血吸收,而防风中的升麻素苷正是符合这一理论,因此,我们对防风色原酮中升麻素苷进行了分离,考察了植物精提复合酶转化升麻素苷的工艺,用HPLC法跟踪检测了反应中升麻素苷的转化率。通过筛选得到我们所研究的植物精提符合酶转化升麻素苷为升麻素的最佳酶转化条件,结果发现,在酶解时间为:48h,在酶解温度:1.1mg/ml,酶解适宜浓度:48℃,此时,植物精提复合酶转化升麻素苷为升麻素均有最大的得率,转化率得率可达98%以上,此时入血成分升麻素含量大量增加,用此方法可以大量制备升麻素,且酶解方法简便有效,快速可控,可用于工业生产。鉴于我国防风资源丰富,其尚有很大的开发前景及空间。通过查阅大量有关报道保肝类的文献,我们普遍发现对于保肝作用的机制都可能与其抗脂质过氧化反应有关。而前人已经报道防风中色原酮,挥发油,及酸性多糖具有一定的抗氧化活性,本实验从这一思路出发,探索了防风粗提物,粗多糖的抗氧化活性及其保肝作用。结果,俩者均有一定的抗氧化活性,且在对CCL4所致的小鼠极性肝损伤也均有显著的保护作用,其前者强于后者。
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