PEDV S1 S2蛋白抗原多表位片段的单克隆抗体制备及表位初步分析

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猪被冠状病毒PED病毒(PEDV)所感染表现出猪流行性腹泻的症状,构成该病毒的蛋白结构可以分为四种类型,即磷酸化的核衣壳蛋白(N)和膜蛋白(M)以及糖基化的纤突蛋白(s)还有小囊膜蛋白(E)。对于B淋巴细胞抗原决定簇来说,S糖蛋白为其最重要的携带者,根据机体实际情况以及实际需要生成抗体,达到免疫保护的基本效果,总之,S蛋白的存在使得病毒的入侵以及致病等基本活动更加顺利的实现。本文主要针对PEDV S1蛋白进行融合蛋白表达,同时选择九条不同的表位多肽片段,以及针对PEDV S2蛋白选择五条不同的表位多肽片段。以三种方式的抗原利用BALB/C小鼠单克隆抗体制备技术得到识别相应抗原表位多肽片段的单克隆抗体,然后针对PEDV S1表达融合蛋白和PEDV S1的九条不同多肽表位以及PEDV S2的五条不同多肽表位获得的单克隆抗体结合活性进行分析,证实在所选的PEDVS1和PEDV S2所选多肽表位片段中,均以靠近C端区域的三条表位多肽的抗原性最好。对融合蛋白得到的单克隆抗体作为抗体效价的参照,后续的PEDV疫苗的研发提供了表位抗原性的参考。
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