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目的构建EBV潜伏期膜蛋白LMP2A编码基因的腺病毒表达载体，初步探讨LMP2A表达对靶细胞SGC-7901的生物学作用。方法RT-PCR扩增获取目的基因LMP2A，采用AdEasy系统构建携带目的基因的重组腺病毒载体pAd-2A，脂质体法将重组质粒pAd-2A转染HEK293细胞包装重组腺病毒。选择EBV阴性胃癌细胞SGC-7901作为靶细胞，试验分重组腺病毒SGC-2A组，病毒对照SGC-GFP组和细胞对照SGC组3组，采用MTT实验、透射电镜观察、流式细胞分析、激光共聚焦等技术检测目的基因LMP2A表达对靶细胞生物学行为的影响。结果①限制性酶切、PCR及测序鉴定证实，目的基因LMP2A正确插入重组质粒，HEK293细胞成功包装出具有稳定感染性的重组腺病毒，命名为vAd-2A，经测定病毒滴度为3.16×1012pfu／L。②MTT检测结果显示：与SGC-GFP组和SGC组比较，SGC-2A组细胞从接种后第2天起表现出更强的增殖能力。③透射电镜观察SGC-2A组细胞的超微结构无明显改变，而SGC-GFP组和SGC组则出现一系列变化，并可观察到凋亡小体。④激光共聚焦分析表明，SGC-2A组细胞几乎均可观察到较强的cyclinE荧光信号；而SGC-GFP组仅部分细胞可观察到cyclinE荧光信号，且较弱；未感染病毒的SGC组细胞则仅有少量细胞观察到荧光。⑤流式细胞分析感染vAd-2A后48h和72h的SGC-7901细胞S期的比例明显高于SGC-GFP和SGC两对照组。结论成功构建了EBV潜伏期膜蛋白基因LMP2A的重组腺病毒表达载体，并在HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒；同时初步证实LMP2A可促进SGC-7901细胞增殖并抑制其凋亡，该作用可能与LMP2A诱导靶细胞cyclinE的表达有关。