【摘 要】
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目的:探索基质细胞衍生因子-1(SDF-1)基因过表达在脑卒中后NPCs突触形成中的作用。方法:采用改良Longa’s线栓法,选用成年雄性SD大鼠制作大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO模型),选取符合标准的大鼠模型,随机分为实验组和对照组;1天后,通过立体定向微量注射的方法分别向两组大鼠患侧脑室内注射一定滴度的rAAV1-SDF-1和rAAV1-LacZ。于术后3、7、14、21、28天对两组大鼠
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目的:探索基质细胞衍生因子-1(SDF-1)基因过表达在脑卒中后NPCs突触形成中的作用。方法:采用改良Longa’s线栓法,选用成年雄性SD大鼠制作大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO模型),选取符合标准的大鼠模型,随机分为实验组和对照组;1天后,通过立体定向微量注射的方法分别向两组大鼠患侧脑室内注射一定滴度的rAAV1-SDF-1和rAAV1-LacZ。于术后3、7、14、21、28天对两组大鼠进行动态的神经行为学评分;6周后取实验组及对照组大鼠脑组织,采用weston blot及ELISA方法测SDF-1及其受体CXCR4蛋白表达量,并利用qPCR方法对SDF-1及CXCR4进行mRNA水平的定量检测;通过免疫荧光多重标记技术检测SDF-1基因在内皮细胞、胶质细胞、神经元及神经前体细胞等不同类型细胞中的表达情况,通过双标SYP/DCX检测实验组及对照组缺血半暗带区域NPCs突触形成情况,通过双标SYP/CD31观察突触形成与微循环之间的关系。结果:(1)大鼠MCAO模型后第1周内实验组及对照组大鼠神经功能损伤评分无明显差异,1周后实验组评分开始低于对照组,且随着时间进展,实验组大鼠的mNSS与对照组差异更加明显;(2)实验组大鼠脑内SDF-1及CXCR4基因及蛋白表达量将对照组明显增多(P<0.05);(3)免疫荧光多重标记发现与对照组相比实验组大鼠的纹状体区域SDF-1在内皮细胞、胶质细胞、神经前体细胞及神经元中的表达均明显增多;(4)在实验组大鼠患侧的纹状体、脑室下区及缺血半暗带区域突触数量较对照组明显增多(P<0.05);(5)与对照组相比,实验组大鼠的缺血半暗带区域血管形态完整、连续性好,突触密集,且主要集中于血管周围。结论:(1)SDF-1基因治疗可以促进脑卒中后大鼠神经功能的恢复。(2)SDF-1可以促进脑卒中后NPCs突触形成。(3)脑卒中后NPCs突触形成与微循环关系密切
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