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白血病是严重危害人类健康的造血系统恶性肿瘤,近年来白血病发病率和死亡率不断升高。2010年,我国城市居民死亡原因中,恶性肿瘤居首位,约占总数的1/3,其中白血病在恶性肿瘤占2.9%。传统的白血病诊断方法主要有周围血象检查、骨髓检查、细胞遗传学检查等。荧光光谱技术是依据激发光激发下不同物质分子荧光光谱存在差异,进而可通过相关的检测手段区分出不同的物质分子的一种光谱检测技术,具有灵敏度高、非介入等特点。目的:基于荧光稳态测量系统QuantaMaster,利用白细胞和白血病细胞白体荧光光谱以及外源性荧光光谱实现白细胞和白血病细胞辨别。为提取外周血实现白血病荧光光谱诊断奠定理论基础,并推动荧光光谱技术在白血病诊断中的应用。方法:检测370nm、400nm和440nm激发光激发下白细胞和白血病细胞的自体荧光光谱,以及405nm激发光下ALA (Omg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml、 0.5 mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml)和PSD-007 (Oug/ml、6.25ug/ml、12.5ug/ml、 25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml)孵育2小时的白血病细胞的荧光光谱,并结合特征峰积分和光谱归一化方法进行分析。最后利用峰相对强度比和光谱差减法,分析了370nm、400nm和440nm激发光激发下白细胞和白血病细胞自体荧光光谱的差异,以及400nm、440nm激发光激发下基于ALA的荧光光谱的差异。结果:不同波长激发光下P628未发生红移或蓝移,峰值大小不同。基于ALA、PSD-007的白血病细胞荧光发射光谱,不同光敏剂浓度下P636、P626起始位置保持不变,峰值大小不同。400nm激发下,白细胞自体荧光光谱的I628/I515约是白血病细胞的2.9倍,差减光谱P628峰面积百分比约为91.4%;基于ALA的白细胞的I628/I515约是白血病细胞的8.6倍,差减光谱P628峰面积百分比约为96.5%。结论:激发光波长及光敏剂浓度对荧光峰位置无影响,只影响荧光强度;特征峰积分和光谱差减分析下,白细胞与白血病细胞的自体荧光和外源性荧光特征差异明显。