益肾通对大鼠前列腺增生细胞内钙的影响及临床证型的相关研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lz251667032
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研究背景述评传统和现代中医对类似“前列腺增生症(简称BPH)”之病名、病因病机、诊断、证型、治疗预防研究;综述“补肾健脾化瘀”治疗“精癃”病的沿革。述评近年来中医、中西医结合临床治疗BPH的现状及BPH中医实验研究现状。概述了老年肾虚与细胞内钙超载的关系以及老年动脉硬化性闭塞症(ASO)发病的相关性研究,按“异病同治”法则引出BPH发病与细胞内钙超载之预期,开拓BPH研究新法。研究目的选雄性SD大鼠,按成熟的造模法复制实验性大鼠前列腺增生模型。之后以导师崔学教教授临床治疗BPH的“益肾健脾化瘀”有效方——益肾通(简称YST)实施药物干预,设立正常组、模型组、治疗组和药物对照组和诸项实验指标,观察YST对大鼠前列腺增生的效用以及对前列腺增生细胞内钙超载的影响,探讨细胞内钙超载与BPH发生发展的关系,进一步探寻YST防治实验性大鼠前列腺增生的机理,为开拓新的研究思路,开发新药作有益的探索。研究方法1实验部分1.1方法按随机对照原则,设立正常组、模型组、泽桂癃爽(简称ZGLS)对照组、YST低、中、高剂量组治疗组,每组6只,计36只,用雄性去势SD大鼠注射丙酸睾酮法复制大鼠前列腺增生模型。除正常组外,其余5组均去势后注射丙酸睾丸酮4mg/kg,连续30天。5组去势后的大鼠除模型组外,其他4组同时给药干预,对造组给ZGLS胃饲给药,治疗组各予低、中、高剂量YST胃饲。药效学试验给药剂量根据临床用量的体重计算:按实验大鼠用量为人用剂量的7倍数给药,ZGLS胶囊对照组按0.7g/kg给药,YST低、中、高剂量组(按0.25g、0.50g、1.00g/kg比例)给药,将每份药粉加3ml蒸馏水兑成等容积混悬液灌胃(灌药前摇匀)、1次/d;正常组、模型组同时给等容积蒸馏水灌胃,1次/d;期间实验大鼠按组分笼饲养,自由进食、饮水。在给药后第31日取材,抽取血样(血清),摘取各组大鼠前列腺。1.2观测指标①称取各组实验性大鼠的前列腺湿重,计算前列腺指数;②制备各组实验性大鼠的前列腺病理切片(HE染色);③检测各组实验性大鼠的血清钙离子浓度;④免疫组化法检测各组实验性大鼠前列腺增生细胞Fas的表达和PCNA的表达;⑤流式细胞仪检测各组实验性大鼠前列腺增生细胞内钙;⑥各指标间相关性研究;1.3结果1.3.1大鼠前列腺增生模型复制成功,其前列腺湿重、指数显示正常组与模型组比较差异显著(P<0.05,),而且光镜下形态学差异明显;1.3.2实验发现YST能有效降低实验性大鼠前列腺湿重(P<0.05),呈现YST各剂量组对实验性大鼠前列腺细胞增殖均有程度不一的抑制;1.3.3结果证实Fas表达中,YST低、中、高剂量组和ZGLS对照组之表达均高于模型组,而且表达量随投药剂量增高上升;PCNA的表达中,YST中、高剂量组之表达远低于模型组,而且YST各组投药剂量与PCNA的表达呈负相关;1.3.4前列腺细胞内钙指标中,YST高剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05),而且分析其均数发现,细胞内钙变化随YST投药量增加而降低;显示YST能有效抑制实验大鼠前列腺细胞内钙超载,在细胞内钙和血清钙两指标的相关性研究中,非线性相关分析证实二者无相关性。结论YST对实验性大鼠前列腺增生有显著疗效。YST防治实验性大鼠BPH的机理之一:极有可能是通过减少前列腺细胞内钙超载,干预前列腺细胞的Fas和PCNA的表达,以降低促增生的PCNA表达、提高能促细胞凋亡(简称PCD)的Fas表达,最终达成促进前列腺细胞凋亡抑制前列腺增生的作用。2临床研究BPH是男科老年常见病。随着我国人口老龄化进程加快,BPH发病率亦逐年趋高。而且近年本病的发病年龄趋前,中年患者增多,严重影响此类病者生活质量。为此BPH的防治颇受关注;本研究之设计旨在探讨肾阳不足型、肾阴不足型的BPH与血清钙浓度变化和前列腺腺体重量之间有否内在联系;笔者回顾性调查研究了102例BPH住院病例。以此扩展中医辩证的内涵,进一步服务于临床。2.1方法纳入符合BPH诊断标准、辩证分型证型属中医肾阳不足型和肾阴不足型的BPH住院病例102例;肾阳不足型和肾阴不足型各51例,年龄介于51~87岁之间,平均年龄68岁;其中51~60岁22例、61~70岁49例、71~80岁27例、81岁以上4例。病程最短者3个月,最长23年;选血清钙浓度、前列腺重量二项为研究指标。具体搜集每例入院翌日晨抽血检测的血清钙浓度,同时搜集每例前列腺B超检查报告的前列腺体积数据,按正常人前列腺比重1.00~1.05,用公式算出前列腺重量(g)=长径(cm)×横径(cm)×厚径(cm)×0.57×1.05g/cm~3。2.2结果2.1血钙指标比较,肾阳不足型与肾阴不足型间比较P>0.05,无显著性差异;2.2前列腺重量指标中肾阳不足型和肾阴不足型间统计学比较无显著差异;2.3血清钙、前列腺重量指标的肾阳不足型和肾阴不足型间相关性分析,比较P>0.05,无显著性差异,相关系数均在0.3以下,提示两指标间无相关性。结论本临床研究结果与动物实验同指标研究的结果相符。但实验研究中细胞内钙和前列腺湿重相关性比较发现两指标间有相关性,结合此点预判:BPH患者细胞内钙与前列腺重量有相关性,今后宜开展这方面研究。
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