携带blaNDM-1基因的肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制及流行病学研究

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携带blaNDM-1基因(其他22株产KPC-2碳青霉烯酶或(和)IPM-4金属酶),有3株大肠埃希菌和2株肺炎克雷伯菌产blaNDM-1金属酶基因。脉冲场凝胶电泳证实3株大肠埃希菌属于不同的脉冲谱型,2株肺炎克雷伯菌的谱型一致,但两者属于不同的亚型。多位点序列分型结果显示3株大肠埃希菌的序列类型分别为ST44、ST2、ST650;2株肺炎克雷伯菌的序列类型均为ST722。药敏结果显示:除2株大肠埃希菌对复方新诺明敏感、2株肺炎克雷伯菌对氨曲南敏感外,对其他12种抗菌药物全部耐药(β内酰胺类,喹诺酮类及氨基糖苷类抗菌药物等均耐药),但对替加环素敏感。5株细菌的改良Hodge试验和EDTA协同试验均阳性。PCR扩增相关耐药基因发现:5株细菌除了同时携带blaNDM-1基因外,Eco1细菌还检测出IMP-4、SHV-11、CTX-M-79、CMY-6、QnrB以及aac(3)-Ⅱ基因;Eco2菌株检测出CTX-M-14、CTX-M-79、CMY-6、QnrB、QnrS及aac(6’)-Ⅰ基因;Eco3菌株检测出CTX-M-14、CTX-M-79、CMY-6、QnrS和aac(6’)-I基因;Kp1菌株检测出IMP-4、KPC-2、SHV-11、CTX-M-14、QnrB及aac(3)-Ⅱ基因;Kp2菌株检测出KPC-2、SHV-11、CTX-M-14、CTX-M-79、QnrS、aac(3)-Ⅱ耐药基因。CCCP抑制试验不能提高菌株对亚胺培南或美罗培南的敏感性。SDS-PAGE分析发现1株肺炎克雷伯菌(Kp2)的外膜蛋白OmpK36发生了缺失。5株细菌的接合试验均获得成功,但仅Eco1、Kp1的blaNDM-1基因成功转移到接合子中;同时部分接合子中还含有其它β内酰胺类耐药基因。  结论证实了本地区出现了携带blaNDM-1基因的肠杆菌科细菌(大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌),该基因能够随着质粒的传播在不同的细菌间转移。细菌由于产碳青霉烯酶,且同时携带各种耐药基因(部分细菌发生了外膜蛋白的缺失)导致了对临床常用抗菌药物几乎全部耐药。
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