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研究背景及意义昆虫发育是一个受到激素调控高度协调的过程,激素调节特定蛋白质的表达,表达后的蛋白质行使功能,完成昆虫的发育。昆虫发育分为完全变态发育昆虫和不完全变态发育昆虫。不完全变态昆虫的幼虫和成虫有一定的差异,而完全变态昆虫幼虫和成虫的形态差异十分巨大。完全变态昆虫的生活史包括卵、幼虫、蛹和成虫,在幼虫向成虫的转变过程中,涉及到组织重建。通过程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD),将幼虫的组织降解掉,同时特定的细胞分化增殖来形成成虫的组织。组织重建过程中,幼虫中肠的重建十分重要,在幼虫中肠PCD过程当中,多种蛋白酶参与到这一过程当中,目前研究发现的蛋白酶包括组织蛋白酶B、组织蛋白酶L、及组织蛋白酶F以及组织蛋白酶D,这些组织蛋白酶在昆虫的发育中起着非常重要的作用。组织蛋白酶的活性位点不同,依据活性位点,组织蛋白酶分为精氨酸组织蛋白酶(D,E)、半胱氨酸组织蛋白酶(B,C,H,F,K,L,O,S,V,W)、以及丝氨酸组织蛋白酶(A,G)。其中,组织蛋白酶B、D、L等在鳞翅目昆虫的发育中有着重要的作用,参与到虫体的组织重建以及免疫过程当中。存在的科学问题虽然有研究表明在虫体中肠组织重建的过程中,CathD的mRNA表达会升高,但是CathD作为一种蛋白酶,有着酶原形式和活性形式,它们的表达有着什么变化?它在组织重建过程中的中肠的定位情况如何?它对于棉铃虫的中肠重建中起着什么功能?研究结果1.CathD具有组织特异性分布,表达在虫体的表皮和中肠。2.CathD表达有时空差异,表皮中只在蛹期有表达,中肠中在变态蜕皮期和蛹期有表达。3.CathD在虫体中肠重建过程中定位于虫体的旧中肠中。4.干扰之后虫体虫体化蛹延迟,幼虫中肠的PCD受到抑制。结论及意义在虫体中肠重建过程中,CathD主要以活性形式存在,定位于幼虫中肠当中,有着促进幼虫中肠PCD的作用;在蛹期成虫的表皮形成过程中,CathD以酶原形式存在,它的定位以及作用还需实验验证。我们首次使用免疫印迹的方法对CathD在虫体发育中的表达情况作了检测,发现酶原形式出现在表皮组织当中而活性形式出现在中肠当中。活性的CathD定位于幼虫中肠中,有着促进幼虫中肠PCD的作用。