本研究应用蛋白酶体抑制剂PSI在体外诱导未分化和分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病(Parkinson’s disease,PD)细胞模型,然后采用蛋白质组学技术对PSI诱导的未分化及分化的SH-SY5Y细胞蛋白质表达谱的变化进行平行分析;并且根据质谱鉴定出的蛋白质,探讨其可能的相关功能,为深入研究PD的发病机制、寻找药物治疗的靶点提供新的线索和依据。为建立PSI诱导的未分化和分化的SH-SY5Y细胞PD模型,采用MTT法检测细胞存活率;AO/EB染色检测凋亡细胞并计算凋亡率;α-synuclein免疫荧光染色鉴定和HE染色观察细胞内包涵体形成。并分别提取两个模型组的SH-SY5Y细胞总蛋白,应用荧光染料标记和差异双向电泳分离蛋白,DeCyder软件分析获得差异蛋白点的表达信息,运用基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定出差异蛋白质。研究结果显示经诱导分化的SH-SY5Y细胞所呈现的形态更为接近神经元,在PSI作用下,MTT法检测结果显示实验组中未分化和分化的SH-SY5Y细胞的存活率均呈时间-剂量依赖性;2.5 umol/L PSI作用于未分化和分化的SH-SY5Y细胞24 h后,AO/EB染色均提示多数细胞出现早期凋亡;H&E染色可见胞浆内嗜酸性包涵体的形成,α-synuclein免疫荧光染色呈阳性。在未分化的PD细胞模型组中,建立了PSI作用前后细胞的双向凝胶电泳图谱,鉴定出18个差异表达蛋白,其中7个表达上调,11个表达下调;质谱鉴定出其中5个蛋白点。在分化的PD细胞模型组中,建立了PSI作用前后细胞的双向凝胶电泳图谱,鉴定出36个差异表达蛋白,其中21个点表达上调,15个点表达下调;质谱鉴定出其中16个蛋白点,但有数个蛋白点是同种蛋白,最终确定为10种蛋白。其中发现的phosphoglycerate dehydrogenase、laminin-binding protein、RuvB-like2、ephrinα2在以往PSI处理SH-SY5Y细胞的PD模型研究中未见报道。这些蛋白可能参与泛素蛋白酶体通路致PD的过程,为深入研究PD的发病机制及神经保护药物的研发提供有价值的线索。