乙肝病毒(adr亚型)转基因小鼠的产生及其诱发性肝脏病理学损伤的研究

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乙型肝炎病毒是一种不完全双链环状的嗜肝DNA病毒,可引起急慢性肝炎、肝硬化等肝脏疾病,并与肝细胞癌的发生有着密切的关系.由于其感染的宿主范围窄,又不感染常规体外培养的细胞,故以转基因小鼠进行HBV的分子生物学、免疫病理学及肝细胞癌发生等方面的研究具有许多独特的优点.作者利用受精卵原核显微注射的方法,将含有两个拷贝的HBV全基因组的片段(adr亚型),通过生殖系导入C57小鼠的受精卵内,并将其植入ICR品系假孕母鼠的单侧输卵管内,在所产的6只仔鼠中,通过鉴定得到了4只整合有HBV基因组DNA的建立者(Founder)转基因小鼠.随后将其进行了品种繁育,并通过基因组DNA的PCR、Dot-blotting或Southern-blotting等方法对所整合的HBV基因组DNA在世代间的遗传行为进行监测,发现所整合的HBV基因组DNA可稳定遗传,其传递方式符合孟德尔的遗传规律.进而采用ELISA和免疫组织化学等方法检测,发现在这些小鼠的肝脏和肾脏中有HBsAg和HBcAg(在血清中也有HBsAg和HBeAg,但水平降低).采用透射电镜和免疫透射电镜在有的肝细胞内找到了Danes样颗粒.
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