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肠安康新组方由黄芪提取物、黄连提取物-盐酸小檗碱及木香提取物组成,经肠安康减去部分药物而来。肠安康为临床经验方,由黄芪、黄连、补骨脂、金银花、生地榆、煨木香六味药物组成,具有健脾益气、清热燥湿、活血化瘀的功效,临床上治疗溃疡性结肠炎(UC)有效。前期研究表明肠安康新组方与肠安康在治疗乙酸诱导的UC大鼠,疗效相当。肠安康新组方,组方简单,治疗UC有效,欲将其开发成结肠定位给药的新剂型。黄芪性温,功能补气升阳,托腐生肌,善治脾虚泄泻；化学成分包括：多糖类、皂甙类、黄酮类及氨基酸等,具有免疫调节作用,因此,结合UC患者整体多虚和黄芪的免疫调节作用,本课题选择黄芪提取物口服给药,在胃内吸收,以达到全身调节的作用。黄连苦寒,可清热燥湿,泻火解毒,善治肠胃湿热所致泄泻,痢疾；主要化学成分为小檗碱；具有抗病原体、抗细菌毒素、抗腹泻、抗炎、免疫抑制作用；传统上认为小檗碱口服不易吸收,血中浓度较低,但最新研究表明人口服小檗碱后能够被吸收,且分布广泛,代谢迅速,因此,结合UC的局部多实(病变主要在结肠),为了提高小檗碱在结肠的浓度,提高生物利用度,选择小檗碱在结肠定位给药,以达到局部调节的作用。木香辛散温通,苦燥而降,善通理三焦之气,配伍黄连则有清热止痢行气止痛之功,取“行气则后重自除”之意；化学成分主要为挥发油,尚含豆甾醇、木香碱、树脂等；具有抗炎和抗腹泻、增强肠的蠕动幅度和肌张力、对抗肠肌痉挛。诸药合用,共奏温补脾肾,清热止痢之效。本课题通过观察肠安康新组方口服给药与结肠定位给药对乙酸性和TNBS／乙醇性UC大鼠模型的影响,考察了肠安康新组方结肠定位给药的适宜性,并对其可能的作用环节进行了探讨,为肠安康新组方研发成结肠定位给药制剂提供实验依据。1口服给药与定位给药对Uc模型大鼠症状的影响对大鼠大便性状的影响：腹泻是由于大肠粘膜对Na+、水吸收障碍,结肠运动功能失常以及粘液细胞层受损导致血清渗出及细胞外液进入结肠所致。肠安康新组方口服给药与定位给药各剂量组可改善由乙酸和TNBS／乙醇引起的UC模型大鼠腹泻状态,大便性状逐渐由稀便转为松散,在乙酸性UC大鼠给药后3d,定位给药高、中剂量与模型组相比出现了显著性差异(P<0.05),而口服给药只有高剂量与模型组出现了显著性差异(P<0.05)；在TNBS／乙醇性UC大鼠给药后4d,口服给药高、中剂量与定位给药高、中剂量与模型组相比出现了极显著性差异(P<0.01),口服给药低剂量与定位给药低剂量与模型组相比有显著性差异(P<0.05),但定位给药高、低剂量的大便性状评分要低于口服给药高、低剂量；直至给药后7d,定位给药低剂量与模型组相比仍有显著性差异,而口服给药低剂量无统计学意义(P>0.05)。综合比较两种给药方式对UC模型大鼠大便性状的影响,结肠定位给药最低有效量明显优于口服给药最低有效量。说明定位给药在改善UC患者临床症状腹泻方面,起效量要低于口服给药。对大鼠大便隐血的影响：便血是由于结肠粘膜受损,包括粘膜血管广泛扩张,以及粘膜面的溃疡所致。肠安康新组方口服给药与定位给药各剂量组可改善由乙酸和TNBS／乙醇引起的UC模型大鼠大便隐血,大便隐血实验逐渐由血便、强阳性(+++)转为阳性(++)和弱阳性(+),对于乙酸性UC大鼠,给药后3d,口服给药高、中剂量与定位给药高、中剂量与模型组相比出现了极显著性差异(P<0.01),口服给药低剂量与定位给药低剂量与模型组相比有显著性差异(P<0.05),且定位给药高、中剂量隐血平均分低于口服给药高、中剂量,至给药后6d,定位给药高剂量与模型组之间仍有极显著性差异(只0.01),定位给药中剂量、口服给药高剂量与模型组之间有显著性差异(P<O.05)；对于TNBS／乙醇性UC大鼠,给药后4d,定位给药高剂量与模型组之间出现极显著性差异(P<0.01),定位给药中剂量与模型组之间出现显著性差异(P<0.05),口服给药各剂量与模型组相比没有统计学意义,且定位给药高剂量与口服给药高剂量之间相比有统计学意义(P<0.05),定位给药中、低剂量的大便隐血平均分要明显低于口服给药中、低剂量,至给药后7d,定位给药高、中剂量与模型组相比仍有极显著性差异(P<0.01),口服给药高、中剂量、定位给药低剂量与模型组相比有显著性差异(P<0.05),口服给药低剂量与模型组相比没有统计学意义。综合比较两种给药方式对UC模型大鼠大便隐血的影响,定位给药的效果明显优于口服给药,说明定位给药在改善粘膜受损方面要明显优于口服给药。2口服给药与定位给药对Uc模型大鼠结肠病变的影响观察口服给药与定位给药对乙酸和TNBS／乙醇造模后,引起的大鼠结肠肿大(体现在重量增加)、长度缩短、宽度增加、肠重指数升高、结肠粘膜损伤的影响,并检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的变化,同时观察口服给药与定位给药对TNBS／乙醇造模后免疫器官的影响。口服给药各剂量和定位给药各剂量对乙酸和TNBS／乙醇造模引起的结肠肿大有明显的改善作用(P<0.05),二者在改善结肠肿大方面效果相近；口服给药高、中剂量和定位给药高、中剂量对乙酸造模引起的结肠缩短有明显的改善作用(P<0.05),对TNBS／乙醇造模引起的结肠缩短有极明显的改善作用(P<0.01),二者在改善结肠长度方面效果相近；口服给药高剂量和定位给药高剂量对乙酸造模引起的结肠宽度增加有极明显的改善作用(P<0.01),口服给药中剂量和定位给药中剂量对乙酸和TNBS／乙醇造模引起的结肠宽度增加有明显的改善作用(P<0.05),二者在改善结肠宽度方面效果相近；口服给药高、中剂量对乙酸造模引起的肠重指数的升高有明显的改善作用(P<0.05),定位给药高、中剂量对乙酸造模引起的肠重指数的升高有极明显的改善作用(P<0.01),口服给药高、中剂量和定位给药高、中剂量对TNBS／乙醇造模引起的肠重指数的升高有明显的改善作用(P<0.05),综合比较,两种给药方式在改善肠重指数方面,定位给药优于口服给药；在改善乙酸造模引起的结肠粘膜损伤方面,定位给药高、中剂量有极明显的改善作用(P<0.01),定位给药低剂量和口服给药高剂量有明显的改善作用(P<0.05),在改善TNBS／乙醇造模引起的结肠粘膜损伤方面,定位给药高剂量有极明显的改善作用(P<0.01),定位给药中、低剂量和口服给药高、中剂量有明显的改善作用(只0.05),综合比较,两种给药方式在改善结肠粘膜损伤方面,定位给药优于口服给药；口服给药高、中剂量和定位给药三个剂量对乙酸造模引起的MPO的升高有极明显的降低作用(P<0.01),口服给药高剂量和定位给药高剂量对TNBS／乙醇造模引起的MPO的升高有极明显的降低作用(P<0.01),定位给药中剂量对TNBS／乙醇造模引起的MPO的升高有明显的降低作用(P<0.05),而口服给药无统计学意义(P>0.05),因此,两种给药方式在改善升高的MPO方面,定位给药略优于口服给药；对TNBS／乙醇引起的UC大鼠的肿大的脾脏和缩小的胸腺有改善作用,尤其在改善肿大的脾脏上,定位给药明显优于口服给药。综合比较,两种给药方式在改善UC大鼠结肠病变方面,定位给药要优于口服给药。3口服给药与定位给药对Uc模型大鼠结肠病理形态学改变的影响观察口服给药与定位给药对乙酸造模引起的UC大鼠结肠上皮细胞形态及炎细胞浸润程度的影响,口服给药与定位给药对TNBS／乙醇造模引起的UC大鼠结肠溃疡、炎症、肉芽肿、病变深度及纤维化的影响。口服给药和定位给药各剂量对乙酸和TNBS／乙醇引起的UC大鼠结肠组织病理形态学损伤有明显的修复作用,以定位给药高、中剂量和口服给药高剂量作用比较明显明显(P<0.05)。综合比较,定位给药在改善UC模型大学病理形态学方面,作用优于口服给药。4口服给药与定位给药对Uc模型大鼠结肠组织中自由基及炎症细胞因子的影响观察口服给药与定位给药对乙酸和TNBS／乙醇引起的UC模型大鼠结肠组织中氧自由基及一氧化氮自由基的影响,同时检测结肠中IL-8含量的变化,早期原癌基因(c-jun)蛋白的表达,推测口服给药与定位给药在治疗UC方面可能的作用机制。定位给药各剂量组对乙酸和TNBS／乙醇引起的UC大鼠结肠组织中降低的SOD. GSH-PX有升高作用,在SOD方面,作用与口服给药相近,在GSH-PX方面,定位给药优于口服给药；对乙酸和TNBS／乙醇引起的UC大鼠结肠组织中升高的MDA、NOS、iNOS、NO有显著的降低作用,且作用明显优于口服给药；对TNBS／乙醇引起的UC大鼠结肠组织升高的炎细胞因子IL-8有降低作用,且作用优于口服给药；口服给药高、中剂量对c-jun的表达有极明显的降低作用(P<0.01),定位给药各剂量组对TNBS／乙醇引起的UC大鼠结肠组织即刻早期原癌基因(c-jun)的表达有极明显的降低作用(P<0.01)；并做了c-jun表达与NOS、iNOS、NO、IL-8的相关性分析,结果显示,c-jun表达NOS、iNOS、IL-8呈非常显著的相关性。综合比较,在降低氧自由基、一氧化氮自由基及炎症因子方面,定位给药优于口服给药；并推测肠安康新组方治疗UC可能是通过抑制炎症因子等的产生和c-jun的激活,阻断炎症的放大效应而起到一定的抗炎效果。结论：对于乙酸和TNBS／乙醇诱导的大鼠UC模型,肠安康新组方结肠定位给药在改善大鼠大便隐血、结肠病变、结肠组织病理形态学、结肠组织自由基及炎症因子方面,均优于口服给药,为肠安康新组方开发成结肠定位给药制剂提供了实验依据；在作用机制方面,结肠定位给药和口服给药可能是通过抑制自由基和炎症细胞因子的产生和c-jun的激活,阻断炎症的放大效应而起到一定的抗炎效果。