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目的：观察知母皂甙(SaponinfromAnemarrhenaasphdeloidesBunge，SAaB)对淀粉样β蛋白25-35(amyloidβ-protein25-35，Aβ25-35)激活巨噬细胞引起小脑颗粒细胞损伤的保护作用，并初步探讨其作用机制。
方法：选用出生2～4d的SD大鼠乳鼠，取小脑，进行小脑颗粒细胞培养，8d后加入小鼠腹腔巨噬细胞进行联合培养，继续培养24h后加入10μmol/L的Aβ25-35，保护组同时加入不同浓度SAaB(10，30，100μg/L)共孵育48h。通过免疫细胞化学染色观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达，采用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌量，应用NO检测试剂盒和乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒测定培养液中的一氧化氮(NO)生成量和LDH漏出量。另外，将Aβ25-35(10μmol/L)刺激的或未用Aβ25-35刺激的巨噬细胞上清液分别加入到单独培养的小脑颗粒细胞中，通过Hoechst33258染色计算凋亡细胞的百分比。
结果：加入Aβ25-35(10μmol/L)到单独培养的48h后，可使培养液TNF-α分泌量明显增加，由空白对照组的18ng/L增加到282ng/L，NO生成量也明显增加，由空白对照组的26μmol/L增加到85μmol/L，iNOS的表达也相应增加。与Aβ25-35组相比，SAaB(10，30，100μg/L)能剂量依赖地抑制这些变化。在巨噬细胞和小脑颗粒细胞联合培养中，Aβ25-35组与空白对照组相比，LDH漏出量明显增加，由23U/L增加到167U/L，免疫组化染色表明，MAP-2表达阳性的小脑颗粒细胞数相应地明显减少，与Aβ25-35组相比，SAaB(10，30，100μg/L)能剂量依赖对抗Aβ25-35引起的LDH漏出量增加，使MAP-2表达阳性的小脑颗粒细胞数目较Aβ25-35组明显增加。将Aβ25-35刺激的巨噬细胞上清液加入到单独培养的小脑颗粒细胞48h后，可使凋亡细胞的百分比明显增加，从正常的11±3％增加到74±9％。说明SAaB能对抗巨噬细胞激活引起小脑颗粒细胞的损伤。
结论：1.SAaB对Aβ25-35激活巨噬细胞引起小脑颗粒细胞损伤有保护作用。2.SAaB对小脑颗粒细胞损伤的保护作用机制与SAaB抑制炎症因子的释放有关。