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巨噬细胞对凋亡细胞快速有效的吞噬并清除,可防止毒性内容物释放,保护机体免受炎症损伤或自身免疫性疾病,有利于维持内环境的稳态。本文对冬凌草甲素增强分化的人组织淋巴瘤U937巨噬样细胞吞噬紫外线(UV)照射诱导U937凋亡的细胞机制进行了系统研究。实验结果表明,低剂量(0.6-2.5μM)的冬凌草甲素具有增强分化的U937巨噬细胞对UV照射(52.1J/m2)诱导凋亡的U937细胞的吞噬作用,此作用可能有利于冬凌草甲素的抗肿瘤活性。进一步研究发现,冬凌草甲素诱导的吞噬刺激被几种蛋白特异性抑制剂所抑制,包括：磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)家族特异性抑制剂wortmannin、磷脂酶C(PLC)特异性抑制剂U73122, Ras抑制剂,Raf1抑制剂,MAPK家族ERK抑制剂PD98059, NF-кB抑制剂PDTC以及COX-2抑制剂NS398。冬凌草甲素与U937细胞作用不同时间后,引起PI3K-Akt, PLC表达上调,Ras-Raf-ERK通路活化,NF-кB/COX-2/Caspase-1途径激活介导白细胞介素(IL-1β)的释放。说明冬凌草甲素激活以上信号途径,发挥调节吞噬的作用。2.5州冬凌草甲素增强吞噬作用的同时,通过激活ERK/NF-кB途径诱导U937巨噬细胞自噬,自噬发挥促进吞噬的作用。自噬特异性抑制剂3MA及自噬相关蛋白Beclin-1siRNA抑制了U937细胞对凋亡小体的吞噬。自噬通过正反馈调节ERK,负反馈调节NF-кB/IL-1β调节吞噬作用。研究还发现,2.5μM冬凌草甲素时间依赖性的诱导活性氧(ROS)的产生,H2O2及-OH是ROS的主要形式。ROS的清除剂NAC, H2O2清除剂CAT及·OH清除剂GSH,抑制了冬凌草甲素增强的吞噬作用。ROS清除剂同时抑制了自噬的发生。ROS通过诱导自噬,降低线粒体膜电位,激活PI3K-Akt及Ras-Raf-ERK途径促进冬凌草甲素诱导的吞噬作用。冬凌草甲素诱导ROS的产生对细胞ATP水平未见显著影响。同时,2.5μM冬凌草甲素时间依赖诱导一氧化氮(NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。NOS抑制剂1400W及L-NAME抑制冬凌草甲素增强的吞噬及自噬,而NO供体硝普钠(SNP)以及炎性刺激剂脂多糖(LPS)与冬凌草甲素作用相似,诱导NO产生,促进对凋亡细胞的吞噬,诱导自噬。NO促进吞噬作用依赖自噬的发生,并通过激活NF-кB/COX-2途径诱导IL-1p释放发挥作用。NF-кB/COX-2/IL-1β途径正反馈NO的产生；而自噬负反馈调节NO的产生,清除过度炎症,发挥调节炎症与免疫平衡的作用。综上所述,冬凌草甲素通过激活PI3K-Akt, PLC γ-Ras-Raf-ERK及NF-кB-COX-2-Caspase-1信号途径从而介导IL-1β的释放刺激U937巨噬样细胞吞噬凋亡小体；这些通路的激活诱导自噬的发生,自噬正反馈调节ERK,负反馈调节炎症通路对吞噬起到促进作用；冬凌草甲素同时诱导ROS及NO的产生,ROS通过降低线粒体膜电位,并激活PI3K-Akt, PLC γ-Ras-Raf-ERK途径诱导自噬而促进吞噬,而NO激活NF-кB-COX-2-Caspase-1-IL-1β炎症通路,诱导自噬的发生,从而促进吞噬。