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植物内生菌(plant entophyte)是指那些生活史的某一段时期生活在植物组织内,对植物没有引起明显的病害症状的一类微生物。内生菌主要为内生细菌、真菌和放线菌。现代研究已表明,植物内生菌是道地药材形成的途径之一。怀山药(Dioscorea opposite Thunb.)为薯蓣科多年生植物薯蓣的块根,是“四大怀药”之一,为河南著名道地药材。目前有关怀山药内生菌报道几乎空白,为了更好的了解和利用怀山药内生菌资源,本研究对怀山药内生菌的类群分布进行了初步探究,进而选取一种优势内生菌,研究其次生代谢产物。本实验以怀山药为材料,采用组织块分离法和研磨分离法从怀山药的根中共分离得到41株内生菌。其中18株细菌,经鉴定为8个属,分别为芽孢杆菌属(Bacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、硫胺素芽孢杆菌属(Aneurinibacillus)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、勒克菌属(Leclercia)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、棒杆菌属(Leifsonia)和链霉菌属(Streptomyces);另有23株真菌,经鉴定为6个属,分别为镰孢菌属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)、地霉菌属(Geotrichum)、弯孢菌属(Curvularia)和链格孢属(Alternaria)。其中芽孢杆菌属细菌和镰孢菌属真菌为优势菌群。本研究通过形态学鉴定和分子鉴定,确定优势内生真菌Doef-1菌株为厚孢镰刀菌(Fusarium chlamydosporum),对其液体发酵产物的甲醇提取物和乙酸乙酯提取物进行了化学成分研究。采用硅胶柱层析进行初步分离,进一步结合Sephadex LH-20,MCI等常压色谱材料和制备型HPLC分离得到8个单体化合物。利用质谱、核磁共振等波谱技术对单体化合物进行了结构鉴定,分别为过氧麦角甾醇(1)、麦角甾-4,22-二烯-3-酮(2)、邻苯二甲酸二丁酯(3)、邻苯二甲酸二异丁酯(4)、烟酸(5)、琥珀酸(6)、戊二酸(7)和Nb-乙酰基色胺(8)。所有化合物均为厚孢镰刀菌中首次分离得到。