舒筋活血胶囊是由红花、香附、香加皮、槲寄生、泽兰叶、狗脊、络石藤、伸筋草、鸡血藤及自然铜十味中药精制而成的复方制剂,具有舒筋活络、活血散瘀之功效。舒筋活血胶囊根据舒筋活血片改变剂型而来,旨在降低制剂服用量、提高生物利用度、更好地发挥药物疗效,方便广大患者的临床使用。现行的质量标准仅采用薄层色谱法对香附、红花和香加皮进行了定性鉴别,并应用HPLC法测定了4-甲氧基水杨醛的含量,要求4-甲氧基水杨醛在生药香加皮里的含量>0.46%,远高于《中国药典》中对生药香加皮的标准(4-甲氧基水杨醛在生药的含量>0.20%),导致市场上的香加皮药材难以满足制剂生产的需要。因此,针对舒筋活血胶囊现行标准存在的问题,亟需建立一个更加科学、全面的质量标准。本项目从指纹图谱、网络药理学、质量标志物和质量标准制定四个方面开展了系统研究,具体内容如下:(1)HPLC指纹图谱结合化学模式识别的建立:首先优化色谱分析方法,确认指纹图谱的十个共有峰,进行方法学考察,包括重复性、精密度、稳定性。采用HPLC–QTOF–MS/MS串联技术指认出指纹图谱中的7个共有峰。考察23批不同厂家的舒筋活血产品(舒筋活血胶囊、舒筋活血片)的相似度,并结合主成分分析、聚类分析和正交偏最小二乘判别分析等化学模式识别方法,实现对舒筋活血产品的整体质量控制。指纹图谱结合化学模式识别方法能有效提升中药整体质量控制的水平,更适合于中药复杂体系的质量评价。(2)基于网络药理学研究舒筋活血胶囊治疗骨质疏松症的分子机制:利用TCMSP数据库筛选出舒筋活血胶囊中十味药材的活性化合物、利用Genecards数据库收集活性成分和疾病共同的靶点、从Uniprot数据库中获得靶点的ID、利用DAVID数据库筛选出重要的通路、利用Cytoscape3.6.1软件得到“药材-化合物-靶点-信号通路”网络关系。筛选出与骨质疏松症相关的16个活性化合物作为质量标志物的候选成分。(3)基于质量标志物五原则选择新的指标成分:根据质量标志物寻找中五个要求:可测性、配伍环境、传递与溯源、有效性、特有性综合考虑制成“蛛网模式图”,选择综合排名靠前的5个质量标志物作为候选指标成分,包括:刺五加苷B、络石苷、羟基红花黄色素A、芒柄花黄素、4-甲氧基水杨醛。其中4-甲氧基水杨醛为原定的指标成分。因此,优化其余4个候选指标成分的液相条件,最终筛选出络石苷作为质量标准中的新指标成分。(4)基于质量标志物制定舒筋活血胶囊的新标准:建立络石苷的薄层色谱鉴别方法和HPLC含量测定方法,薄层色谱分析对舒筋活血胶囊中的络石苷进行定性鉴别,并对络石苷薄层色谱的方法和HPLC含量测定方法进行考察。针对原有的指标成分4-甲氧基水杨醛,优化含量测定方法,考察不同厂家的舒筋活血制剂中4-甲氧基水杨醛的含量差异,并进行方法学考察。最终建立了较为完整的舒筋活血胶囊质量标准。