布鲁氏菌病（Brucellosis）是由于感染布鲁氏菌（Brucella）而引起的一种人畜共患的传染病,简称布病。近年来,随着我国家畜养殖业的快速发展,家畜及其产品的频繁流通,动物间和人间的布鲁氏菌病疫情呈现持续上升的趋势。其中,羊布鲁氏菌病最为常见,而且羊布鲁氏菌病更容易传染给人类。为了保障我国畜牧业持续稳定健康地发展,保障畜产品安全以及广大人民群众的生命健康,布鲁氏菌病的防控净化已成为当下的必然趋势和要求。早期准确诊断对布鲁氏菌病防控和净化具有重要意义。因此,建立快速、灵敏的布鲁氏菌病检测方法是防治布鲁氏菌病的迫切需求。血清学检查常被用于多种疫病的诊断,其中,ELISA方法灵敏度高、操作简单、特异性强,是目前常用的一种快速准确的检测方法。布鲁氏菌外膜蛋白16（OMP16）具有较好的免疫原性,在布鲁氏菌的6个种属中均广泛存在,并在所有生物变种中均保守存在。本研究以B.suis S2疫苗株的基因组作为模板,经PCR扩增、原核载体构建、IPTG诱导,NTA树脂层析柱亲和层析法纯化重组蛋白OMP16,SDS-PAGE和Western-blot鉴定分析纯化后的OMP16,再以纯化后的OMP16作为包被抗原,优化筛选出最佳的反应条件,建立检测布鲁氏菌抗体的间接ELISA方法。研究结果如下:（1）通过原核表达,诱导纯化,制备出了重组蛋白布鲁氏菌OMP16,且该重组蛋白与羊布鲁氏菌阳性血清具有良好的反应原性。（2）使用纯化后的重组蛋白OMP16作为包被抗原建立了检测羊布鲁氏菌抗体间接ELISA方法,最佳的反应条件为:抗原包被浓度1μg/m L,血清稀释倍数为10倍,酶标二抗的稀释倍数为1∶1000,TMB显色反应时间为30 min。（3）本研究建立的检测羊布鲁氏菌抗体间接ELISA方法具有良好的灵敏度,与虎红平板凝集试验的总体符合率达到了93%,阳性符合率为75.0%,阴性符合率为94.6%。本研究建立的检测布鲁氏菌病的间接ELISA方法具有良好的灵敏度,与虎红平板具有良好的符合率,具有应用于生产实践中布鲁氏菌病的检测的潜力,可为布鲁氏菌Omp16基因缺失疫苗的应用提供检测方法。