随着现代医疗技术的发展,癌症以及其他危及生命的疾病治疗后的存活率逐渐增加。在挽救生命的同时,治疗药物可能会伤害卵巢内的卵母细胞,最终导致不孕。随着试管婴儿的出现,辅助生殖技术在解决不孕不育方面取得了显著成效。雌性哺乳动物卵巢内储存着大量的卵泡,其发育受到自分泌因子和旁分泌因子调控,所以影响腔前卵泡在体外发育的因素有很多。大多数卵泡在发育的不同时期受体内外影响,会逐渐闭锁走向退化,离体腔前卵泡培养可挽救这些卵泡。本研究以小鼠卵泡为研究对象,以小鼠卵泡体内发育的研究为基础,探索小鼠腔前卵泡体外分离培养的最适方案。（1）小鼠卵巢和卵泡在体内的生长发育。为探究小鼠卵泡体内的自然发育情况,本研究采用机械方法,剥离1 d-21 d小鼠的卵巢和卵泡,观察小鼠卵巢和卵泡的生长发育情况。通过测量小鼠卵巢面积和直径,发现21 d内小鼠卵巢面积和直径逐渐上升。随着日龄的不断增长,小鼠卵泡也不断地生长发育。对21 d内小鼠卵巢组织学分析发现,小鼠在出生时卵巢内只有原始卵泡。随着日龄不断增加,原始卵泡逐渐发育为初级卵泡、次级卵泡、有腔卵泡和成熟卵泡。小鼠卵巢内存在着多个发育阶段的卵泡。分析不同发育阶段的小鼠卵泡和卵母细胞面积比值,发现卵泡的生长发育分为两个阶段:第一阶段为腔前卵泡,小鼠卵泡和卵母细胞面积呈比例增长;第二阶段为有腔卵泡时期,卵母细胞略有增长,卵泡显著增大,在此阶段卵泡液不断积累。（2）促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）对离体培养的小鼠卵泡生长发育的影响。本研究分别在培养基中添加六个不同浓度的FSH（0 m IU/ml、10 m IU/ml、50 m IU/ml、100 m IU/ml、150 m IU/ml、200 m IU/ml）,离体培养小鼠卵泡10 d,观察FSH对小鼠卵泡生长发育的影响。研究发现未添加FSH的卵泡生长缓慢,且未能发育出卵泡腔;添加FSH的卵泡均发育出卵泡腔。添加FSH培养的卵泡生长面积极显著高于未添加FSH的卵泡（P<0.01）。FSH对卵泡生长的促进作用与其浓度并未呈现出正相关。50 m IU/ml FSH培养的卵泡面积最大,并且显著高于150 m IU/ml FSH和200m IU/ml FSH的卵泡（P<0.05）。10 m IU/ml FSH培养的卵泡成功排出颗粒细胞-卵母细胞复合体,卵母细胞成功排出第一极体。这说明FSH在一定浓度范围可促进卵泡的生长发育。（3）FSH对小鼠卵泡类固醇激素合成酶的影响。在体外培养2 d、4 d、6 d、8 d、10 d和11 d,六个时间点,探究FSH对卵泡基因表达的影响以及雌二醇的分泌。研究发现,FSH在一定时间内可以上调17β-HSD、CYP19A1和3β-HSD的表达,3β-HSD的表达水平与小鼠卵泡的生长发育有关。在培养前期,雌二醇的分泌与FSH具有剂量依赖性;培养后期,FSH与雌二醇没有严格的剂量依赖性,过高的FSH会影响雌二醇的分泌。研究说明FSH能促进卵泡的体外发育,10 m IU/ml的FSH最适宜卵泡体外的发育,这些研究结果可以为濒危动物的保护和人类繁殖医学的研究增添理论和实践数据。