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氢氧化细菌系一类可以以氢气为唯一能源进行化能自养生长的细菌。其独特的代谢特点导致其分离、筛选条件较为严格且分筛步骤较为复杂,因而截至目前已报道的氢氧化细菌种质资源十分有限,进而致使与其相关的植物促生机制的研究仍处于探索阶段。为进一步扩大氢氧化细菌的种质资源,研究不同豆科植物根际氢氧化细菌的种属差异,以及不同菌株可能涉及的植物促生机制,本文以三叶草根际土壤为研究对象,依靠氢、氧、二氧化碳混合气体循环培养体系用基础培养基平板对其中的细菌进行富集与分离,结合气相色谱法检测菌株氢化酶活力以筛选其中的氢氧化细菌,再以生理生化试验结合16S rDNA序列分析研究其种群类型。同时,用分光光度法测定各氢氧化细菌ACC脱氨酶活力,从ACC脱氨酶角度考察其植物促生潜力。另外,以铬天青双层平板从各氢氧化细菌中筛选铁载体阳性菌株,再用铬天青检测液对阳性菌株进行铁载体半定量测定,筛选其中的铁载体高产菌株,从铁载体角度考察其植物促生潜力。经基础培养基平板对三叶草根际土壤富集并分离,共得到41株细菌。经氢化酶活力测定,共筛选出18株氢氧化细菌。经近30项生理生化实验检测及16S rDNA序列分析,判定氢氧化细菌AD-2、AD-10、JX-42至JX-49为Pseudomonas sp.,AD-4为Stenotrophomonas sp.,AD-6为Mycoplana sp., AD-13、BD-4及BD-6为Microbacterium sp.,BD-1为Paracoccus sp.,BD-8及BD-19为Arthrobacter sp.,BD-11为Serratia sp.经与各氢氧化细菌处于同一系统发育树分枝的近缘菌株的生理生化特征比对,判定菌株AD-13为Microbacterium oxydans,BD-11为Serratia nematodiphila,JX-42为Pseudomonas gessardii,JX-48为Pseudomonas mandelii。经ACC脱氨酶活力测定,共得到14株ACC脱氨酶阳性菌株,占氢氧化细菌总数的77.78%,其中一些菌株的酶活力可以达到或超过其他植物根际促生菌。经铬天青双层平板筛选,共选出8株铁载体阳性菌株,占氢氧化细菌总数的44.44%。经铬天青检测液测定,共得到4株铁载体高产菌株,其中一株菌的铁载体产量与其他植物根际促生菌相当。以上实验结果表明,三叶草根际氢氧化细菌种群类型与其他豆科植物有较大差异,寡单胞菌属、枝动杆菌属、微杆菌属和沙雷氏菌属为新发现的氢氧化细菌类群,为广泛研究氢氧化细菌的种群多样性奠定了一定的基础。三叶草根际氢氧化细菌具有ACC脱氨酶活性的现象比较普遍,同时三叶草根际也具有部分铁载体高产菌株,为确定氢氧化细菌属于植物根际促生菌提供了有力的证据,并为未来深入研究氢氧化细菌植物促生机制奠定了坚实的基础。