把生物传感器技术应用于基因重组发酵过程的在线监控,运用顺序注射分析技术,完成样品的在线预处理,采用固定化酶-化学发光检测法测定发酵液中的关键底物甘油和甲醇的浓度。本论文主要包括两个方面内容:1.运用顺序注射分析技术,完成了样品的在线预处理,并采用固定化酶-化学发光检测法测定甲醇的浓度,建立了一种在线监测甲醇酵母发酵诱导阶段发酵液中甲醇浓度的新方法。在选定的最佳条件下,甲醇浓度在0%-1.0%(V/V)范围内与化学发光强度呈良好的线性关系(R = 0.9995),RSD为1.9%(n=11),72 h内RSD为5.0%(0.2%甲醇溶液)。该法在线自动完成过滤、稀释、测定等操作,分析速度快,长期稳定性高,能满足在线监测甲醇酵母发酵液中甲醇浓度的要求。2.运用顺序注射固定化酶-化学发光分析技术,样品经在线预处理(在线过滤和在线稀释)后,在甘油激酶-磷酸甘油氧化酶酶反应后生成过氧化氢,后者通过鲁米诺化学发光反应测定,建立了一种在线监测甲醇酵母发酵细胞生长期发酵液中甘油浓度的新方法。在选定的最佳条件下,甘油浓度在0%-5.0%(V/V)范围内与化学发光强度呈良好的线性关系(R=0.9997),RSD为2.5%(n=11)。该方法自动化程度高,分析速度快,能基本满足测定发酵液中甘油浓度的要求。