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目的:世界范围内乳腺癌发病率、死亡率高,严重威胁女性的健康。本研究旨在通过“一步法”制备抗HER2单克隆抗体偶联纳米白蛋白紫杉醇制剂(Abra/anti-HER2),并通过体内、外实验验证其对HER2阳性乳腺癌的抗肿瘤作用,初步探讨其机制。方法:将纳米白蛋白紫杉醇(Abraxane(?))及抗HER2单克隆抗体(anti-HER2 monoclonal antibody)通过EDC/NHS法进行一步偶联。利用透射电镜(TEM)及动态光散射(DLS)检测偶联纳米粒的形态及粒径分布,设立空白对照组、Taxol(?)、Abraxane(?)及Abra/anti-HER2纳米药物组,分别从体内及体外比较其对HER2阳性乳腺癌(SKBR-3)的抗肿瘤作用。CCK-8法检测药物的细胞毒作用,DAPI染色观察药物诱导的细胞核形态变化,流式细胞术(FCM)检测药物处理后细胞周期分布变化,蛋白印迹法(Western blot)检测药物处理后凋亡相关蛋白表达水平变化。构建荷瘤裸鼠模型,尾静脉注射药物,观察肿瘤大小变化及裸鼠生存曲线,实验结束后切取裸鼠重要器官行H-E染色。另将药物与近红外染料NIR-797进行物理吸附,利用小动物活体成像仪实时观察药物在裸鼠体内的分布。结果:本研究成功构建Abra/anti-HER2纳米药物,DLS及TEM证实其粒径分布均匀,大小约为1OOnm;CCK-8结果显示Abra/anti-HER2纳米药物处理SKBR-3细胞48h后测得 IC50 远低于其它组别(0.002 μg/mL VS 0.04 μg/mL(Taxol(?))、0.02μg/mL(Abraxane(?)),p<0.05);DAPI结果显示相较于其它两组,Abra/anti-HER2纳米药物组可观察到更多的核固缩及凋亡小体等凋亡征象;FCM检测结果显示Abra/anti-HER2纳米药物组的S期阻滞率较其它两组明显升高(66.63±2.21%VS45.61±4.47%(Taxol(?))、54.99±2.01%(Abraxane(?)),p<0.05);为进一步探讨凋亡机制,我们使用 Western blot对凋亡相关蛋白进行检测,结果示caspase3等凋亡相关蛋白表达上调,提示药物诱导细胞凋亡为其抗肿瘤机制;体内实验证实Abra/anti-HER2纳米药物具有更强的肿瘤抑制率(0.336±0.027cm3VS2.210±0.138cm3(生理盐水对照组),p<0.05)及更好的机体耐受性,小动物活体近红外成像可见Abra/anti-HER2纳米药物组的信号相比Abraxane(?)及Taxol(?)组在肿瘤部位有更强的蓄积且持续时间更长,提示其具有较强的肿瘤靶向性。结论:体内外实验证实Abra/anti-HER2纳米药物具有优于Abraxane(?)及Taxol(?)的肿瘤杀伤力,且Abra/anti-HER2纳米药物具有更强的肿瘤靶向性及缓释性。