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双氢青蒿素（dihydroartemisilun，DHA）为抗疟药青蒿素的衍生物，具有比青蒿素更强的抗疟活性。其分子式为C15H24Os，分子量为284．35，熔点为145～150℃，熔融时同时分解；在三氯甲烷中易溶，在丙酮中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，在水中几乎不溶。
经皮给药系统（transdermal drug delivery system，TDDS）是指药物以一定的速率通过皮肤，经毛细血管吸收进入体内血液循环，从而产生药效的一类制剂。TDDS具有与其它传统口服制剂无法比拟的优点。它不仅可以避免肝脏“首过效应”，降低毒副作用，而且可以减少给药剂量，降低血药峰浓度，缩短治疗疗程。由于临床上双氢青蒿素片口服剂量大，疗程长，复燃率高。为此，选择将其制成经皮给药制剂。先是对DHA贴剂进行研究，但DHA透皮速率很小，因此研发DHA贴剂的难度较大。为此，选择DHA软膏及凝胶进行研究。
本论文研究了DHA软膏和凝胶处方与体外渗透性，对DHA凝胶质量标准进行了研究，并对其进行了药效与安全性评价。
1．处方前研究在处方前研究中，采用HPLC法测定了DHA油水分配系数、溶解度。结果以正辛醇为油相，超纯水为水相的DHA油水分配系数logP=2．6768，表明DHA脂溶性较大。在PEG400溶液，生理盐水，乙醇/生理盐水等溶液中，DHA在40%PEG400溶液中的溶解度最大，为（0．5128±0．0014）mg/ml。但在体外透皮试验筛选接收液中，以乙醇/生理盐水（2：8）为接收液中DHA的浓度能够达到HPLC检测限的要求，DHA稳态渗透速率显著增加（P<0．05），达到（29．14±4．6789）mg/ml，为此选择乙醇/生理盐水（2：8）为接收液。通过DHA体外透皮试验方法学考察，建立了一种DHA的含量测定方法。预柱PhenomenexC18（4mm×3．0mm），色谱柱KromasilC18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈—水（60：40），流速1．0ml/min，检测波长216nm，柱温25℃。结果显示该法精密度好，RSD为0．64%；准确度高，回收率为97．02%；DHA在0．25325～10．13μg的范围内进样量与峰面积呈现良好的线性关系，线性方程为Y=31170．7799X—1355，1672，r=0．9999；供试品溶液在分析浓度下，45小时内基本稳定。结果表明以乙醇/生理盐水（2：8）为接收液建立的体外透皮试验方法稳定、可靠，适用于DHA经皮给药系统的体外透皮试验研究。
2．处方研究
选择油溶性、乳膏等3种软膏基质和水溶性凝胶基质分别制成DHA软膏，经过体外透皮试验，结果以卡波姆等基质制成的水溶性DHA凝胶的DHA稳态渗透速率最大，为（18．351±8．257）μg/（h．c㎡），故选择由卡波姆等组成的基质为DHA的处方。在促渗剂筛选中，含3%氮酮的DHA凝胶增渗倍数最高，为不含促渗剂的2．52倍，而含5%氮酮的DHA凝胶渗透速率比3%氮酮的大，故选择5%氮酮为DHA凝胶的促渗剂。对载药量进行筛选，发现载药量为10%的DHA稳态渗透速率最大，故选择10%的DHA载药量。但在安全性试验中，发现含5%氮酮的DHA凝胶对家兔皮肤有刺激性。可能由于氮酮使DHA促渗作用增强而产生刺激性。为此，在DHA凝胶中不加入促渗剂，进行防腐剂筛选，通过安全性试验发现其不会对家兔产生皮肤刺激性，DHA凝胶6个月内没有出现霉变等现象，因而确定DHA凝胶的防腐剂为0．1%尼泊金乙酯。
3．质量标准研究
DHA凝胶是一种微具特殊气味的混悬型乳白色凝胶。采用pH计测定DHA凝胶酸碱度，结果表明其接近中性。在显微镜检查DHA凝胶粒度时，没有发现大于180μm的粒子。其他鉴别和检查均能符合2005年版《中国药典》第二部项下有关规定。采用HPLC法对DHA凝胶进行方法学考察，建立了一种DHA的含量测定方法。预柱PhenomenexC18（4mm×3．0mm），色谱柱KromasilC18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈—水（60：40），流速1．0ml/min，检测波长216nm，柱温25℃。结果显示该法精密度好，RSD为0．34%；准确度高，回收率为100．08%；DHA在1．0005～40．02μg的范围内进样量与峰面积呈现良好的线性关系，线性方程为Y=29．403X—3．0169，r=1；供试品溶液在分析浓度下，24小时内基本稳定。结果表明该法检测DHA的专属性强，避免了因DHA衍生化反应不完全而引入的误差，简化了操作，缩短了分析时间，所建HPLC法简便、快速、准确，适用于DHA凝胶的含量测定及稳定性研究。
4．药效及安全性研究
以卡波姆等为基质，0．1%尼泊金乙酯为防腐剂，载药量为10%，制成DHA凝胶，进行药效学和安全性试验。采用Peters法和4d抑制性试验法进行小鼠抗疟试验，DHA凝胶小剂量17．5mg/kg/d就能使小鼠全部转阴并且没有复燃，治愈率达到100%。用家兔进行皮肤刺激性试验和豚鼠进行皮肤过敏性试验，涂抹约含310．8mgDHA的凝胶后无一只家兔皮肤出现红斑和水肿；在过敏性试验中，涂抹约含138．88mgDHA的凝胶在除去药物1h和24h后，分别有1只豚鼠出现轻微的过敏反应。结果表明，DHA凝胶对家兔的皮肤无明显刺激性，对豚鼠皮肤为弱致敏性。
综上所述，利用高分子材料卡波姆等水溶性基质制得的DHA凝胶经皮给药能够达到杀灭疟原虫的作用。其创新之处体现在以下几个方面：
（1）目前未查到双氢青蒿素经皮给药处方及体外渗透性研究的相关文献，为此本研究首次报道了双氢青蒿素的体外经皮给药研究，填补了国内外的空白。
（2）DHA凝胶的制备工艺简单，对设备要求不高，成本低廉，使用方便，特别适合在疟疾（又称穷人病）重灾区非洲销售使用。
（3）DHA凝胶给药剂量少于口服剂量的五分之一就能使感染疟原虫的小鼠全部转阴，并且在一个月内没有复燃，治愈率达到100%，其疗效显著。
（4）在安全性方面，DHA凝胶对家兔的皮肤无明显刺激性，对豚鼠皮肤为弱致敏性，说明该药安全性良好。
基于上述优点，将DHA凝胶研制成一种抗疟疾新药是很有前途的。