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目的:利用地塞米松(Dex)制作骨骼肌萎缩大鼠模型,同时结合自然衰老大鼠模型,观察糖皮质激素增高与骨骼肌脂肪含量、脂质代谢相关基因表达变化的关系,探析糖皮质激素-糖皮质激素受体信号通路(GCR通路)的异常激活在骨骼肌脂质异常沉积诱导骨骼肌萎缩过程中的作用及中医治法的干预作用,对丰富中医抗衰老的科学内涵、推动临床应用提供了理论基础。方法:1.1Dex诱导模型:雄性SD大鼠,3月龄,体质量(200±20)g,构建Dex诱导模型,随机分5组:1)正常组(Normal):腹腔注射生理盐水。2)模型组(Dex):腹腔注射Dex,同时灌胃生理盐水。3)中药组(Dex+Tcm):腹腔注射Dex,后灌胃补肾健脾方。4)电针组(Dex+Acu):腹腔注射Dex,后针刺百会穴、命门穴和足三里穴,取双侧足三里穴给予电针刺激。5)拮抗剂组(Dex+RU-486):腹腔注射Dex,后腹腔注射糖皮质激素受体拮抗剂RU-486。实验周期为14天,每天一次。1.2自然衰老模型:雄性SD大鼠,23月龄,体质量(900±100)g,构建自然衰老模型,随机分3组:1)老年组(Old):腹腔注射生理盐水。2)老年中药组(Tcm):每周饮补肾健脾药液5天,后停药2天。3)老年拮抗剂组(RU-486):腹腔注射生理盐水。取材前一周,腹腔注射糖皮质激素受体拮抗剂RU-486,连续注射1周。实验周期为3个月,每天一次。另设雄性SD,3月龄,体质量(200±20)g大鼠为青年对照组(Young),腹腔注射生理盐水。1.3生化指标检测:留取腓肠肌组织。HE染色法观察腓肠肌肌纤维的变化;油红O染色法观察腓肠肌脂肪沉积变化;LC/MS技术检测各组腓肠肌脂质代谢物并筛选差异性的生物标记物。Western blotting技术检测腓肠肌中GR、SIRT2、PPARγ蛋白表达量的变化。Q-RT PCR技术检测腓肠肌PPARγ mRNA相对表达量的变化。结果:1.1与正常组比较,模型组大鼠腓肠肌纤维横截面积明显下降;腓肠肌组织脂滴含量明显增加,脂肪沉积现象明显。与模型组比较,正常组、电针组、中药组及拮抗剂组4组腓肠肌肌纤维的粗细均有明显改善,肌纤维横截面积增粗;腓肠肌组织脂滴含量明显下降,脂肪沉积现象改善。脂质代谢组学分析评价显示每组大鼠样本组内聚集情况较好;而组间的代谢轮廓发生了改变,TG、DG、MG、PC、PE、LPC、LPE等多种脂质代谢物含量发生变化,且表达呈上升趋势。分子水平检测结果:与模型组比较,补肾健脾方、电针及拮抗剂均可使Dex诱导大鼠腓肠肌GR、PPARγ蛋白表达显著下调(P<0.05),SIRT2的蛋白表达显著上调(P<0.05);PPARγ的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05)。1.2与青年对照组比较,老年大鼠腓肠肌组织脂滴含量明显增加,脂肪沉积现象明显。与老年组比较,老年中药组和老年拮抗组2组腓肠肌肌纤维的粗细均有明显改善,肌纤维横截面积增粗;腓肠肌组织脂滴含量明显下降,脂肪沉积现象改善。脂质代谢组学分析评价显示每组大鼠样本组内聚集情况较好;而组间的代谢轮廓发生了改变,TG、DG、MG、PC、LPC等脂质代谢物含量发生变化。分子水平检测结果:与老年组比较,补肾健脾方、拮抗剂均可使老年大鼠腓肠肌GR、PPARγ蛋白表达显著下调(P<0.05),SIRT2的蛋白表达显著上调(P<0.05);PPARγ的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05)。结论:Dex诱导模型大鼠,以及自然衰老模型大鼠的高水平皮质酮能异常激活GCR通路,下调组蛋白去乙酰化酶SIRT2的表达,上调脂肪合成关键基因PPARγ表达,诱导骨骼肌部位脂肪异常沉积,应用RU-486阻断GCR通路,能纠正上述分子表达的异常水平,提示GCR通路是促进骨骼肌脂肪异常沉积的关键通路。中医疗法(中药、电针)能通过调节GCR通路,调控相关分子表达水平,从而改善脂肪异常沉积导致的骨骼肌萎缩。