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甜菊糖苷是甜叶菊叶片中提取的二萜配糖体混合物,主要由甜菊苷(St)、莱鲍迪甙A(RA)和莱鲍迪甙C(RC)组成,具有高甜度和低热量的特点,对糖尿病人、肥胖人及老年人的健康有很好的作用。甜菊糖苷中RA的口感类似于蔗糖,可以作为一种理想甜味剂。本文以分离出纯度较高的RA为目的,探讨利用溶析结晶法和液液萃取法分离提纯RA,并对薄层色谱法分析测定RA及不同溶剂对RA溶解的选择性进行了初步研究,主要的工作和结论如下:1.建立了利用薄层色谱分析测定RA的方法。结果表明,展开剂为异丙醇/乙酸乙酯/丙酮/水(30/52/3/15),可将甜菊糖苷分为RA和X两部分,分离度为2.4;显色剂为苯胺/二苯胺/磷酸/甲醇(2ml/2g/10ml/100ml),RA显色斑点的扫描波长为330nm;点样量在2×10-5g4.5×10-5g的范围内,呈线性相关性,方程为Y=8776+4.1×108X (R2=0.96);平均回收率108.8%,相对误差8.8%,重现性实验的变异系数为3.9%。2.考察了不同溶剂对RA的溶解选择性。结果表明,溶液中RA浓度的增加,溶解过程RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数呈增大的趋势;甲醇和乙醇对RA的溶解选择性弱于其他醇溶剂;甜菊糖苷在醇类溶剂中的溶解度随溶剂极性减小而减小;甜菊糖苷甲醇溶液浓度为40g/L120g/L时,结晶过程RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数小于1;极性小于甲醇的醇类溶剂溶解过程RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数大于1。3.探讨了利用溶析结晶法分离提纯RA。结果表明,各因素的水平变化时,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数和甜菊糖苷收率的变化呈相反趋势;乙酸乙酯含量在40%60%范围内逐渐增大,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数呈现先减后增趋势;甜菊糖苷初始浓度在20g/L40g/L、温度在8℃28℃及时间在6h14h的范围内逐渐增加,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数减小;溶析结晶法分离RA的较佳条件为:甜菊糖苷初始浓度20g/L、结晶温度18℃、结晶时间8h和乙酸乙酯含量50%,此时甜菊糖苷的收率为34%,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数为3.8。4.研究了利用液液萃取法分离提纯RA。结果表明,氯仿含量及油水比变化时,RA与甜菊糖苷其他组分分离系数和RA收率的变化呈相反趋势,氯仿含量由20%增加到60%时,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数减小;油水比在1∶1.41.4∶1范围内增大,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数增大;浓度在0.6g/L1.4g/L范围内增大,RA收率、RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数呈先减后增趋势;萃取温度在3℃23℃范围升高,RA收率、RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数呈先增后减趋势;液液萃取法分离RA的较佳条件为:氯仿含量40%、浓度1.5g/L、油水比1∶1、温度18℃,该条件下RA收率为78%,RA与甜菊糖苷其他组分的分离系数为1.8。