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对柑桔深加工及综合利用和类黄酮研究的现状进行较详细的综述；同时对橙皮苷及其衍生产品的性质、制备、分离、结构改性方面国内外的研究现状作了介绍。 通过初步建立筛选模型，对20来份土样和实验室保藏的菌种进行大量筛选，选育出了一株有较高选择性的橙皮苷酶活性黑曲霉菌株D7（1），初始酶活力为544.9u／ml。其最佳发酵培养基：麸皮8.0％、豆饼粉2.0％、KH2PO40.1％，每30mL培养基中加5mL0.1％的橙皮苷；最佳产酶条件：250mL的三角瓶中装量30mL，初始pH为6.0，以4层纱布包扎，在250r／min，30℃的摇床中培养4天；水相最佳酶反应条件：最佳pH4.0、反应温度为55℃。对该菌株进行了初步的紫外诱变处理，得到一株变株D7（1）-1，橙皮苷酶活提高了19％，达到1146U／ml。 对黑曲霉菌株D7（1）-1的产酶性质、酶学的特性及酶反应工艺作了一定的研究。通过硫酸铵分步盐析、反相柱层析、离子交换对酶进行纯化分离，证明橙皮苷酶包含两种酶的活性：鼠李糖苷酶和葡萄糖苷酶，其中鼠李糖酶为葡萄糖酶活性的9.5倍。经过对酶初步纯化后，酶的最适宜的反应条件为：最适作用pH为4.0，其pH值作用范围比较宽，pH稳定性在pH3.6—6.0之间较稳定；最适温度作用范围为30-55℃，在55℃时表现出最高酶活；在30℃下具有较好的稳定性，温度高于60℃热稳定性较差；粗酶可在4℃时保存4天酶活基本不变。酶的动力学参数为：Km=0.54mmol／ml，Vm=0.8umol／l*min-1。酶的作用方式是：该酶首先作用于鼠李糖—葡萄糖之间的糖苷键，对芸香糖苷水解活性较高，使得体系中的芸香糖含量很低。 通过在反应体系中添加DMF解决了橙皮苷溶解度、反应浓度很小的问题，少量的DMF几乎不影响酶活，当DMF加至40％，酶活还可保持在90％以上。酶的最适宜的反应条件为：在橙皮苷浓度为5％，加入酶量（酶活819.1u／ml）为1／4总反应液体积，酶反应的最佳pH 4.5，最佳酶反应温度为60℃，DMF／水=5：15，反应时间为0.5小时。将酵母和橙皮苷酶的共固定化，解决酶的重复利用、葡萄糖的反馈抑制和鼠李糖与葡萄糖分离的目的。装柱量约为3／4体积，水解温度为浙江工业大学硕士学位论文中文摘要600C，循环速度5川1/，;lin 11寸，最千1毛反应jl寸j、ITJ为60分钟，循环10个尸刁期酶活保持在85%左右，半衰期为1200分钟。 比较了产物的不同的分离方法，最后确定的分离方法为:反应混合物用2倍乙醚提取4一5次，蒸发得橙皮素粗品。提取余液一再川31%的乙酸乙醋萃取得橙皮素单糖昔粗品，将滤液经浓缩，结晶可得到较纯的鼠李糖。 对产物的精制:将萃取得到的单糖营配成2cy0的乙醇溶液，上D.〔，【柱，吸附30分钟后，用25%的乙醇洗去杂质，一再用40%的乙醇将单糖二首洗下，纯度达98.02%。对橙皮素的精制为:配成2%的乙醇溶液，上D，t，，柱，吸附30分钟后，先用10倍体积的水洗去杂质，然后一丙)}」25%的乙醇洗脱，纯度达95%以}几。 最后，对橙皮什和水解户:物抗氧化性、。一糖二阵酶的抑制、氧和烃基自山基的清除进行了初步的侧!究。结果表明:（l）在汕脂的J亢氧化性方面:橙皮营及其水解产物均有一定的抗氧化效果，其「I，:橙皮素的效果甚至优于V，:和BHT+BI认的混合物，但它们在汕脂的抗氧化方面均表现为:前期效果较好后期效果较差。（2）在对一氧自山基和经基自山基的清除方面:三者均有一定的自山基清除能力。对氧自山基清除上，三者的强弱顺序为橙皮素>橙皮素单糖二阵>橙皮二首。对径基自山基的清除上，低浓度时，三者的作用相当，在浓度较高时强弱顺序为橙皮素>单糖二汗>橙皮二首。单糖二营和橙皮汁对轻基自山基的清除低于对氧自山的清除，而橙皮素在高浓度时对氧自山基和烃基自山基清除相当。（3）对。一糖有酶的抑制方面:三者都有抑制作用，一单糖二什的J一[1J制效果较好，水溶液达82%而DMF液为8吐.5%。