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目的：
将中华仓鼠卵巢(Chinese Hamster Ovary， CHO)细胞的CMP-唾液酸转运体(CMP-sialic acid transporter， CMP-sat)基因进行克隆，并在大肠埃希菌中表达，为今后进一步研究该基因及其表达产物的作用奠定基础。
方法：
1.在CHO细胞中提取总RNA。
2.RT-PCR扩增CHO细胞的CMP-sat基因。
3.构建CMP-sat基因的克隆载体CMP/pMD18-T并测序鉴定。
4.构建CMP-sat基因表达质粒CMP/pET42a。
5.将CMP/pET42a在IPTG诱导下进行目的基因表达，表达产物进行SDS-PAGE鉴定。
结果：
1.在CHO细胞中提取的总RNA经琼脂糖凝胶电泳检测清晰可见18S和28S RNA带，且28S带的亮度是18S带亮度的2倍左右。
2.CMP-sat基因的RT-PCR产物和PCR产物经琼脂糖凝胶电泳可见1条1000bp左右的条带，大小与报道的CMP-sat基因的理论报道大小相符，说明CMP-sat基因的RT-PCR是成功的，PCR扩增到了特异的目的基因片段。
3.构建的CMP/pMD18-T克隆载体中目的基因片段的测序结果与Genbank公布的中华仓鼠CMP-sat基因序列完全相同。
4.重组的表达质粒CMP/pET42a在IPTG诱导下表达的蛋白质经SDS-PAGE电泳显示有清晰的蛋白表达条带，相对分子量约为36.4kD。目的蛋白表达量占菌体总蛋白的38.5％。
结论：
利用分子生物学技术成功实现CHO细胞CMP-sat基因的克隆及在大肠埃希菌中的表达。