背景与目的:绝大多数(90%以上)头颈部肿瘤在组织学上属于鳞状细胞类型,因此它们常被归为头颈部鳞状细胞癌(Head and Neck Squamous Cell Carcinoma,HNSCC)。HNSCC是世界上第六大常见的癌症,也是发展中国家第三大常见的癌症。鼻咽癌是头颈部鳞癌中的常见类型,导致鼻咽癌患者预后差的最主要原因是这些肿瘤的高侵润潜能。HNSCC细胞特异性表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP),其表达与侵袭能力有关。国内外研究发现,Smad信号的激活可通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)增强HNSCC细胞的MMP-13表达和侵袭能力。在这里,我们研究了鼻咽癌细胞中抑制型Smad7通过p38途径在调节MMP-13表达和细胞迁移和侵袭的作用。方法:(1)采用Western Blot方法分别检测在CNE-1、5-8F、6-10B中Smad7的表达水平。(2)将si-Smad7及Smad7过表达质粒转染至鼻咽癌细胞中,并通过Transwell试验了解其对细胞迁移、侵袭的影响。(3)利用实时荧光定量PCR技术检测MMP-2,-9,-13在鼻咽癌细胞中添加p38抑制剂前后的相对表达。(4)使用Western Blot技术检测转染后的鼻咽癌细胞中总p38、phospho-p38及的表达水平。并添加p38抑制剂SB203580,观察其对MMP-13表达的作用。结果:(1)我们利用Western Blot技术,对CNE-1、5-8F和6-10B细胞中Smad7的表达水平进行比较,结果显示:Smad7在鼻咽癌细胞中表达存在差异。(2)由此我们筛选出Smad7表达相对较低的5-8F细胞进行Smad7过表达质粒的转染,相反的选择CNE-1细胞行si-Smad7的转染。并通过Transwell实验发现,Smad7能够抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力。(3)我们利用MMP-2,-9,-13引物,通过实时荧光定量PCR技术,对鼻咽部正常上皮细胞及肿瘤细胞中的MMPs进行比较,发现三种MMPs在鼻咽癌细胞中高表达,而添加SB203580后,表达虽均有一定程度的降低,但可以看出MMP-13的表达最能够被有效抑制,且仅为未添加组的32.9%。(4)我们通过在5-8F细胞中转染Smad7过表达质粒,在CNE-1细胞中转染si-Smad7,有效控制Smad7的表达。SB203580以10μM的浓度给予,检测出,Samd7过表达时,Phospho-p38及MMP-13的表达量降低,而干扰Smad7表达时,Phospho-p38及MMP-13的表达量增高。且这一变化可有效的被p38抑制剂所阻止。而在内源性表达Smad7的鼻咽癌细胞中,我们也同样发现,Smad7高表达的肿瘤细胞中,MMP-13及phospho-p38的表达相对低,而Smad7相对表达较低的肿瘤细胞中,MMP-13及phospho-p38呈现高表达趋势。也就是说,Smad7与MMP-13的表达呈负相关,且这一过程可通过p38途径介导。结论:在本研究中,我们阐明了Smad7对鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力存在抑制作用。我们的研究结果还表明,无论是在内源性还是干扰及过表达Smad7的细胞中,Smad7与MMP-13的表达呈负相关,且这一过程很可能由p38途径所介导。这为我们提高对单个基质金属蛋白酶具体作用的理解和选择性地靶向药物制剂的开发提供了新的启发,这也可能是未来有效治疗鼻咽癌的一个组成部分。