lys A基因编码二氨基庚二酸脱羧酶(DAPDC)，该酶将二氨基庚二酸(DAP)转化为L-Lys，因此DAPDC对细菌的生长和生存至关重要。本实验从盐生杜氏藻高盐培养液中分离纯化了一株盐单胞菌，并从形态、生理以及16S rDNA等方面进行初步鉴定，将它命名为Halomonas sp.ZL-4。 采用鸟枪法构建了Halomonas sp.ZL-4部分基因组文库。提取Halomonas sp.ZL-4的总DNA，经限制性核酸内切酶Sau 3A I消化后回收1～6 Kb大小的酶切片段，与经限制性核酸内切酶Bam HI酶切消化、回收后的质粒pUC19连接，热转化感受态细胞E.coli DH5 α。在此基础上，进行克隆子的测序工作。通过与数据库中已知序列进行比对，获取了lys A基因的信息。将该基因经PCR扩增回收后，采用限制性内切酶Bam HI和Eco RI进行双酶切，同时对pET-32a载体进行了相应双酶切。将两者回收后连接，转化大肠杆菌BL21，构建成重组质粒pET-lysA。重组子pET-lys A和对照pET-32a经原核诱导表达后，对比分析了两者细胞总赖氨酸和细胞外赖氨酸含量，发现重组子赖氨酸产量显著高于原始菌株，并且随着培养时间延长赖氨酸逐渐分泌到细胞外。此外还对比分析了重组子和对照的DAPDC粗酶提取液在相同条件下的酶促反应，结果表明重组子DAPDC的酶活性是对照的1.78倍。可见克隆的lys A基因已经转入受体菌并具有较高的活性。