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棉大卷叶螟(Sylepta derogata Fabricius)属鳞翅目螟蛾科，是一种分布广泛的多食性害虫。为了深入了解棉大卷叶螟的吐丝机理，本文研究了棉大卷叶螟丝素P25基因，通过基因克隆技术得到其cDNA序列全长，并检测分析在不同发育阶段、取食不同寄主后棉大卷叶螟丝素P25基因的相对表达量。以此为基础，进行RNA干扰试验，采用饲喂法干扰其丝素P25基因的表达，从而进行功能验证。主要研究结果如下: 1、通过比对其他已知的鳞翅目昆虫的丝素P25基因，运用RACE法克隆得到棉大卷叶螟丝素P25基因全长。棉大卷叶螟丝素P25基因cDNA全长为859bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG，编码区全长为663bp，并将所获得的基因全长提交到GenBank，登录号为KY792994。依据棉大卷叶螟丝素P25基因的核苷酸序列转换为其氨基酸序列，并加以分析，估算该蛋白分子量为25.653kDa，等电点pI为8.02。将所获得的基因全长同已经登录到GenBank的其他昆虫丝素P25基因序列进行同源性比对，与大蜡螟（Galleria mellonella）的同源性最高，达到63％，其次为外米缀蛾（Corcyra cephalonica），同源性为62％。 2、运用实时定量PCR技术，检测分析在不同发育阶段、取食不同寄主后棉大卷叶螟丝素P25基因的相对表达量。分析结果表明，丝素P25基因的相对表达量与棉大卷叶螟的虫龄、虫态变化紧密相关。P25基因相对表达量的特点主要体现在2L幼虫和预蛹期各有一个高峰，其中预蛹期的表达量最高;1龄，3龄，5龄幼虫丝素P25基因的表达量相对较低;蛹期及羽化后，丝素P25基因的表达量快速下降，近乎于零;饲喂苘麻叶片的棉大卷叶螟2龄幼虫丝素P25基因的相对表达量最高，蜀葵和棉花次之，且蜀葵略高于棉花，木槿最低。 3、将表达棉大卷叶螟丝素P25基因dsRNA的菌液以饲喂法的方式干扰其幼虫目标基因的表达。喂食不同菌液浓度的试验结果表明，喂食表达dsRNA菌液后相对表达量均有所下降。而喂食不同虫龄棉大卷叶螟幼虫不同天数菌液的试验结果表明，饲喂菌液天数越长，表达量均会呈现下降趋势，其中3龄幼虫的下降幅度要小于其他虫龄，且对5龄幼虫的干扰效果最好。在不同寄主上饲喂菌液的试验结果表明，饲喂菌液后，不同寄主上的棉大卷叶螟2龄幼虫丝素P25基因表达量均有所下降，其中以苘麻为寄主的幼虫丝素P25基因表达量显著下降。以上试验结果表明菌液浓度、取食时间、取食虫龄、取食寄主均会对丝素P25基因干扰效率产生影响。