FHL2对人鼻咽癌5-8F细胞恶性生物学行为影响及相关机制

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aaabbbcccabc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  检测永生化非癌性人鼻咽上皮细胞NP-69(NP-69)及鼻咽癌细胞株5-8F (5-8F)细胞中FHL2蛋白质水平,以探讨FHL2基因对人鼻咽癌5-8F细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及其可能的作用机制。  方法:  1、用Western blot法检测NP-69和5-8F细胞中FHL2表达情况,分析FHL2与鼻咽恶性肿瘤相关联情况。  2、利用脂质法将FHL2干扰序列转入5-8F细胞株,荧光显微镜下观察转染效率,并采用定量real-time PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测转染后5-8F各组细胞中FHL2的mRNA与蛋白质水平,建立干扰效果稳定的5-8F细胞系。  3、利用CCK-8法、细胞平板克隆形成实验、划痕实验及Transwell实验分别检测转染后5-8F各组细胞增殖、迁移及侵袭能力。  4、利用定量real-time PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测转染后5-8F各组细胞中c-myc,β-catenin的mRNA与蛋白质水平,探讨FHL2影响人鼻咽癌5-8F细胞恶性生物学行为的可能机制。  结果:  1、Western blot实验结果显示鼻咽癌细胞株5-8F的FHL2蛋白质水平高于NP-69(P<0.01)。  2、倒置荧光显微镜下观察转染效率,结果显示转染siRNA 24h后5-8F细胞转染效率约为80%,且转染siRNA的5-8F细胞中FHL2表达水平显著低于无关序列组和空白对照组(P<0.01)。  3、CCK-8实验结果表明,敲低FHL2基因后,5-8F细胞增殖能力明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),然而NC组和空白对照组相比无明显差异(P>0.05)。  4、集落形成实验结果显示下调FHL2表达后可以削弱5-8F细胞的集落形成能力。  5、划痕实验结果显示,与NC组和Control组相比,si-FHL2组的5-8F细胞迁移速度明显下降(P<0.01)。  6、细胞体外侵袭实验结果显示与NC组和Control组相比,si-FHL2组的5-8F细胞穿模细胞数明显减少(P<0.01)。  7、定量real-time PCR(qRT-PCR)及Western blot实验结果显示转染组5-8F细胞中c-myc,β-catenin的mRNA及相应蛋白质水平均有不同水平下降(P<0.01)。  结论:  1. Western blot实验结果显示5-8F细胞中FHL2蛋白质水平高于NP-69 (P<0.01),提示FHL2在鼻咽癌的发生发展过程中发挥了一定作用。  2. CCK-8实验、集落形成实验、划痕实验及细胞体外侵袭实验显示敲低FHL2基因后可以抑制5-8F细胞增殖、侵袭及迁移能力(P<0.01)。  3.定量real-time PCR(qRT-PCR)及Western blot实验结果显示转染组5-8F细胞中c-myc,β-catenin的mRNA及相应蛋白质水平均有下降(P<0.01)。提示FHL2可能通过Wnt信号通路影响鼻咽癌5-8F细胞的恶性生物学行为。
其他文献
给出一种利用现有公用电话网的远程分布式监测系统的设计思路.介绍了系统的结构原理、内部通信约定和数据库的主要构造,提出一种高效率的监控程序代码二次固化法,并就提高系统的
线性代数是经济管理类专业的公共必修基础课,线性代数的学习能够对后续课程的学习产生很大帮助.本文针对当前线性代数教学中学生遇到的困难,给出线性代数教学的几点建议,包括
在教育初始阶段当中,绘本属于一种关键性的阅读教材.其并非单纯讲故事,它有利于助力学生建立起健康良好的思想构造.绘本已经被我国相关机构公认为最符合儿童阅读教学的图书,
摘要:小学阶段是培养学生各项综合能力的黄金时期。就以小学生作文的教学指导来说,作文在语文这个科目的应用中贯彻始终,从小学到初中,从初中再到高中,作文始终是语文的一大版块。因此,教师必须高度重视作文教学指导的每一个环节、每一个步骤。  关键词:小学语文;作文写作;教学指导  本文旨在提升小学生作文写作能力,通过科学合理的引导方法激发学生学习写作的兴趣,以学习兴趣为内在驱动力量使学生获得良好的学习体验
本文通过对荣华二采区10
《地域文化》博大精深,内涵丰富,自有精髓。设置《地域文化》课程有利于大力弘扬传承文化传统,牢固树立爱国情怀;研究地域文化,因地制宜,能更好地为政治、经济和文化服务;丰
课堂有效性的提高是深化课程改革的关键,教师应适应新课标改革的要求,改进教学理念和方法,提高数学课堂教学的有效性,本论文通过对当前初中数学课堂教学的现状及出现的问题进
本文通过对改性稀浆封层技术的具体概念,来分析得出其在公路养护中进行应用所具有的作用,该技术的应用,不仅使得公路养护的效果得到了提升,而且也减轻了公路养护所耗费的时间
摘要:隨着我国素质教育改革的不断深入,诸多小学语文教师也在进行小学课堂改革工作,其最终目的就是顺应社会发展潮流,响应素质教育改革的号召,实现以培养学生语文核心素养为核心的教学改革目标。在这种情况下,诸多新型的现代化教学模式以及理念逐渐出现在了小学语文课堂当中,并取得了显著成效。而其中应用成效最为显著的就是小组合作学习教学模式,不仅可以极大地提升学生的合作学习意识、竞争学习意识以及学习兴趣度,还有助
提出先高温恒定源扩散后再低温恒量扩散的两步扩散法制作Si背面场太阳电池的新工艺.与常规的一步恒定源扩散工艺比较,所制作的太阳电池短路电流Isc提高了约20%,开路电压Voc也