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金黄色葡萄球菌是一种重要的条件致病菌,能够引起广泛的感染。在感染早期,金黄色葡萄球菌通过表面黏附素的入侵、定殖寄主细胞,在这个过程中,表面黏附素中的两个主要成员FnbpA和ClfA发挥着至关重要的作用。针对金黄色葡萄球菌的侵染机制,我们以FnbpA和ClfA为免疫原基因,并且引入了大肠杆菌热不稳定肠毒素B(LTB)作为粘膜免疫佐剂,构建了四组核酸疫苗pcDNA3.1-FnbpA、pcDNA3.1- LTB-FnbpA、pcDNA3.1-ClfA、pcDNA3.1-ClfA-FnbpA,并且鉴于核酸疫苗可诱发较强的细胞免疫但体液免疫抗体滴度不甚理想的事实,又构建了相应基因的原核表达载体,高效表达蛋白,采取了“质粒免疫/蛋白加强”这种免疫策略,利用小鼠动物模型进行鼻黏膜免疫,并对免疫效果进行评价。ELISA实验数据显示,ClfA组激发的IgG抗体水平略高于FnbpA组,但差异不显著(P>0.05);而FnbpA组产生的IgA抗体水平却极显著的高于ClfA组(P<0.01),这说明FnbpA基因更有效的激发了黏膜免疫。通过血清活性实验可知,FnbpA组和ClfA组均成功的激发了抗金黄色葡萄球菌黏附蛋白的、有免疫调理活性的特异性抗体,无论是黏附抑制率还是巨噬细胞吞噬能力,FnbpA组都显著强于ClfA组(P<0.05)。攻毒试验进一步证明了FnbpA组比ClfA组更好的起到了对小鼠的保护作用,前者比后者攻毒保护率高出了13.49个百分点。虽然FnbpA组的免疫效果强于ClfA组,但这两组的免疫效果总体来说并不很理想,然而ClfA及FnbpA这两个基因的融合组却表现出了极强的免疫力。无论是抗体的激发,还是血清活性的检测,乃至乳腺攻毒,实验数据都明显的好于其它组,差异显著(P<0.05)。总之,通过一系列实验我们证实了ClfA与FnbpA基因融合表达能够更好的激发小鼠的免疫应答作用,而在这两个基因中,FnbpA起到的免疫效果比ClfA更加突出。同时也证实了LTB作为黏膜免疫佐剂的免疫增强功能,我们估计LTB、ClfA和FnbpA三者融合表达的免疫效果可能会更好,有待于进一步的实验证实。