针药结合预处理对急性心肌梗死大鼠模型相关因子影响的研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jx34343
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目的:本实验以蹊径通脉汤结合针刺内关穴、心俞穴、足三里穴对SD大鼠进行预处理,并以高脂饮食喂饲联合盐酸异丙肾上腺素注射液皮下注射诱导急性心肌梗死大鼠模型,研究针药结合预处理对急性心肌梗死大鼠模型心电图、心肌组织病理及血清CTRP3、ADMA、hs-CRP的调控作用,探究针药结合预处理对急性心肌梗死大鼠模型的潜在保护作用及可能机制。材料与方法:50只大鼠按随机数字表法随机分为:对照组、模型组、针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组,共计5组,每组10只。针药结合预处理组:每日8时以蹊径通脉汤19.35g/(kg·d)灌胃,每日1次,持续14日。每日10时进行电针干预,选取双侧“内关”、双侧“心俞”、双侧“足三里”,留针15min,每日1次,持续14日。具体施针方法如下:(1)将大鼠伏卧于操作台上,绑缚固定。(2)参照《实验针灸学》中大鼠腧穴的定位方法,内关穴取穴于前肢内侧,离腕关节约3mm左右的尺桡骨之间,左右侧各1穴;心俞穴取穴于大鼠背部位于第五胸椎下两旁,平肋间,左右侧各1穴;足三里穴取穴于膝关节后外侧,在腓骨小头下约5mm处,左右各1穴。揣定腧穴后,进行常规局部消毒,以华佗牌一次性无菌针灸针(0.18*25mm)进行针刺。(3)内关穴直刺0.2-0.3cm;心俞穴向内斜刺0.2-0.3cm;足三里穴直刺0.2-0.3cm。待大鼠稳定后,同侧内关穴与足三里穴连接同一导线的正负极。(4)采用疏密波,频率2-20Hz,电流2-3m A,电流强度以大鼠前后肢出现与电针频率相一致的轻微颤动为宜。中药预处理组:每日8时以蹊径通脉汤19.35g/(kg·d)灌胃,同等绑缚固定,不针刺,每日1次,持续14日。西药预处理组:每日8时以阿司匹林肠溶片9mg/(kg·d)灌胃,同等绑缚固定,不针刺,每日1次,持续14日。模型组:每日8时予等量的生理盐水灌胃,同等绑缚固定,其余不予任何干预因素,正常饲养14日。对照组:每日8时予等量的生理盐水灌胃,同等绑缚固定,其余不予任何干预因素,正常饲养14日。干预期间各组大鼠均以普通饲料饲喂,自由摄取食水,并持续观察大鼠的一般状态。预处理14日结束后,对针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组、模型组进行造模。40只造模组大鼠停用普通饲料,以高脂饲料饲15g/只饲养喂21日;10只对照组大鼠正常饲喂等量普通饲料。预处理干预如前不变,同期进行21日。第22日10时所有大鼠采用左下腹腹腔注射10%水合氯醛进行麻醉处理,并将其仰卧位固定于操作台上,40只造模组大鼠以采用一次性多点位注射ISO悬浮液85mg/kg复制动物模型,10只对照组大鼠采用四肢根部皮下一次性多点注射等体积生理盐水,均间隔24h注射第2次,使用Power Lab数据采集分析系统,描记Ⅱ导联心电图。根据造模前后大鼠心电图T波变化、ST段变化判定造模是否成功。并于造模成功24h后取材检测心肌组织病理、血清CTRP3、ADMA、hs-CRP水平。结果:1各组大鼠生命状态观察适应性喂饲阶段,各组大鼠的饮食及排泄情况均正常,精神状态良好,毛色光亮,动作敏捷,体重正常增长。预处理阶段,各组大鼠生活状态与之前没有明显改变。造模阶段,对照组大鼠无明显变化,高脂饮食喂饲各组大鼠体重增加明显高于对照组,毛色略显黄色,光泽度有所减退,出现不同程度的精神萎靡、反应迟钝。造模结束后,对照组大鼠无明显变化,其余各组大鼠出现不同程度的毛发干枯无光泽,精神萎靡,活动减少,唇舌、爪甲青紫,以模型组最严重,针药结合预处理组最轻微。2各组大鼠心电图Ⅱ导联ST段电压变化比较造模后,与对照组比较,模型组、针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组大鼠心电图ST段电压变化有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组大鼠心电图ST段电压变化有统计学意义(P<0.01),且针药结合预处理组大鼠心电图ST段电压变化优于中药预处理组和西药预处理组(P<0.05);中药预处理组与西药预处理组ST段电压变化无明显差异。3各组大鼠左心室心肌组织病理改变(显微镜200X)通过观察各组大鼠心肌组织HE染色切片发现:对照组:心肌细胞结构规则,心肌纤维排列规整,润盘、横纹肌清晰,无断裂、缺损及空白区。模型组:心肌细胞结构明显紊乱,心肌纤维排列不规则且伴有肿胀,有大量炎性细胞浸润,润盘、横纹肌模糊,可见明显断裂、缺损及空白区。针药结合预处理组:与模型组比较,心肌细胞结构基本正常,心肌纤维排列基本有序,润盘、横纹肌基本正常,炎性细胞浸润明显减少,偶见轻微的断裂、缺损及空白区。中药预处理组:与模型组相比较,心肌细胞结构有所改善,心肌纤维排列较为有序,润盘、横纹肌明较正常,炎性细胞浸润明显减少,有的部位偶见轻微的断裂、缺损及空白区。西药预处理组:与模型组相比较,心肌细胞结构相对规整,心肌纤维排列有所修复,润盘、横纹肌有所恢复,炎性细胞略有减少,有的部位可见断裂、缺损及空白区。4各组大鼠血清CTRP3水平变化比较与对照组比较,模型组、针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组CTRP3水平降低,有明显差异(P<0.01);与模型组比较,针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组CTRP3水平升高,有明显差异(P<0.01);与中药预处理组比较,针药结合预处理组、西药预处理组CTRP3水平升高,有明显差异(P<0.05);针药结合预处理组和西药预处理组CTRP3水平无明显差异(P>0.05)。5各组大鼠血清ADMA水平变化比较与对照组相比,模型组、针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组ADMA水平升高,有明显差异(P<0.01);与模型组相比,针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组ADMA水平降低,有明显差异(P<0.01);与针药结合预处理组比较,中药预处理组、西药预处理组ADMA水平降低,有明显差异(P<0.05);中药预处理组与西药预处理组对比,ADMA水平无明显差异(P>0.05)。6各组大鼠的血清hs-CRP水平变化比较与对照组相比,模型组、中药预处理组、西药预处理组hs-CRP水平升高,有明显差异(P<0.01);与模型组相比,针药结合预处理组、中药预处理组、西药预处理组hs-CRP水平降低,有明显差异(P<0.01);与针药结合预处理组比较,中药预处理组、西药预处理组hs-CRP水平升高,有明显差异(P<0.01);与中药预处理组比较,西药预处理组hs-CRP含量降低,有明显差异(P<0.05);针药结合预处理组与对照组相比,hs-CRP含量变化无明显差异(P>0.05)。结论:1、针刺内关穴、心俞穴、足三里穴结合自拟蹊径通脉汤预处理,对于急性心肌梗死大鼠模型具有潜在的预防作用,可显著减轻急性心肌梗死大鼠模型心肌组织病理变化,对急性心肌梗死大鼠心电图、血清CTRP3、ADMA、hs-CRP水平有良性调节作用。2、针药结合预处理较比于中药预处理和西药预处理在急性心肌梗死大鼠模型预防方面具有显著优势。
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