【摘 要】
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山柰(Kaempferia galanga L.)是药食两用植物,花形似蝴蝶,亦可作盆栽,极具观赏价值。小花山柰(K.parviflora Wall.ex Baker)是重要的药用植物,植株株形好,叶形漂亮可观赏,可作室内观叶和林下地被植物。山柰和小花山柰主要依靠根茎繁殖,繁殖效率低、速度慢,反复重茬会导致种性退化,还会引起病虫害等造成减产。因此,本研究以山柰和小花山柰为实验材料,就外植体的选择、
【基金项目】
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广东省自然科学基金项目(2018A0303130237); 中国科学院战略生物资源计划(KFJ-BRP-017-19);
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山柰(Kaempferia galanga L.)是药食两用植物,花形似蝴蝶,亦可作盆栽,极具观赏价值。小花山柰(K.parviflora Wall.ex Baker)是重要的药用植物,植株株形好,叶形漂亮可观赏,可作室内观叶和林下地被植物。山柰和小花山柰主要依靠根茎繁殖,繁殖效率低、速度慢,反复重茬会导致种性退化,还会引起病虫害等造成减产。因此,本研究以山柰和小花山柰为实验材料,就外植体的选择、消毒技术和植物生长调节剂等因素对植物组织培养的影响进行了相关研究,以期培育优良的无病菌的种苗,建立山柰和小花山柰的高效快繁体系,为山柰和小花山柰的工厂化生产提供可行的技术方法和理论依据。主要研究结果如下:(1)以山柰根茎为外植体,MS为基本培养基,经过三步消毒方式,75%酒精60 s,0.1%Hg Cl2消毒3 min,无菌水冲洗1遍,0.1%Hg Cl2消毒4 min,无菌水冲洗5遍,接种到MS+1.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+250.00 mg/L特美汀(p H 5.8)的启动培养基上,外植体消毒成功率最高为83.33%。通过分析6-BA、TDZ和NAA不同种类的植物生长调节剂及浓度,筛选出山柰增殖生根的最佳培养基为MS+3.00 mg/L 6-BA+0.75 mg/L TDZ(p H 5.8),增殖系数为5.20,山柰组培苗的生长旺盛,芽增殖与生根同时发生,生根率100%,且根系发达,根较粗壮且长。组培苗移栽至泥炭土:珍珠岩=1:3的基质中,放至温室中培养,30 d后,成活率100%。移栽至大田后成活率100%,且组培苗生长状况很好,苗较壮,且无病虫害。(2)以小花山柰根茎为外植体,MS为基本培养基,经过75%酒精消毒60s、无菌水冲洗1次、0.1%Hg Cl2消毒4 min,无菌水冲洗1次、0.1%Hg Cl2消毒5 min、无菌水冲洗5次的消毒后,接种到MS+4.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+250.00 mg/L特美汀(p H 5.8)的启动培养基上,成功率为76.88%。小花山柰最佳增殖培养基为MS+10.00 mg/L 6-BA+1.00 mg/L TDZ+0.20 mg/L NAA(p H5.8),既能获得较高的芽增殖倍数4.33,又能得到长势较好的无菌苗,同时实现了芽增殖与生根同步,生根率达100%,根较细长,须根极其发达。小花山柰组培苗移栽至泥炭土:珍珠岩=1:3的基质中,放至温室中培养,30 d后,成活率为68.58%。(3)以小花山柰无菌苗根茎薄切片为外植体,通过正交试验设计方法研究了6-BA、TDZ和2,4-D三种植物生长调节剂不同组合对小花山柰无菌苗诱导愈伤组织的影响。研究结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+3.00 mg/L 6-BA+1.00 mg/L TDZ+0.20 mg/L 2,4-D(p H 5.8),培养60 d后,诱导率为64.29%。因为时间关系,未能进行愈伤组织分化、诱导长芽等实验。
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