LAIR-1／9.1C3／p40为识别同一分子的不同称谓。LAIR-1的cDNA于1997年被克隆。基因位于人染色体19q13.4，编码的分子属于免疫球蛋白超家族，胞膜外区含有一个Ig C2-1样结构域，胞浆区含有两个ITIM基序。当LAIR-1结合配体或用相应mAb交联后可募集SHP-1，介导抑制信号。LAIR-1主要表达于淋巴细胞，包括T细胞、B细胞和NK细胞等。LAIR-2为LAIR-1的祖先基因，与LAIR-1基因相邻，为分泌型蛋白。LAIR-1和LAIR-2在免疫球蛋白结构域有84％的相似性。最近，小鼠LAIR-1由我室克隆成功。 Ep-CAM属于黏附分子，胞膜外区含有两个上皮生长因子样重复序列，N端富集半胱氨酸。Ep-CAM既广泛表达于正常上皮，介导同型腺上皮的黏附功能，其表达程度与肿瘤的分化密切相关。 Ep-CAM与LAIR-1／2相互作用在2001年得到证实。LAIR-1／2主要与Ep-CAM胞膜外区第一个EGF样的结构域结合。本实验主要包括以下五个部分。 第一，通过RT-PCR，从白血病细胞系Jurkat和HL-60中获得了4种新的LAIR-1异型，按照分子量的大小和来源分别命名为L-1、L-2、H-1和H-2。其中，L-1、H-1和H-2具有完整的开放读框，I-1和H-2包含了第四军医大学博士学位论文 英文摘要LAIR的Ig结构域。LAIR刁异型可能与白血病中异常的选择性剪切相关。 第二，构建了LAIR刁胞膜外区真核OAIR八myc）和凉核（LAI刁表达质粒，表达了相应蛋白。分别通过抗 c－myc单抗交联的 Sepharose 4B和谷眺甘肽交联的 Sepharose 4B纯化，制备了 LAIR1多抗。Western Blot证实了HL－60中表达小分子量的LAIR相关蛋白。 第三，通过RTPCR从肾综合征出血热患者PBMC中克隆了LAIR．二cDNA。构建了原核（LAIR卫－GST）和真核（LAIR上－myc）融合蛋白基因并表达和纯化。应用淋巴细胞杂交瘤技术，制备了4株能够与真核蛋白反应的单克隆抗体，抗体腹水效价为 10－6。并建立了夹心 ELISA检测LAIR－2方法。 第四，通过RTPCR从直肠癌和乳腺癌肿瘤组织中克隆了即（AMCDNA。构建了EpCAM－GST融合蛋白表达基因并表达和纯化，制备了15株单克隆抗体。不同的即cAM InAb在免疫组化方面的染色情况不同，2A9只着染腺体细胞膜，而 4B则能够着染腺上皮的细胞膜、核膜以及间质中的炎性细胞。 第五，利用＊u8A和共聚焦的方法鉴定了＊川又1、＊川凡2和 卜＊AM之间作用的表位和相互作用的关系。通过Ep＊AM特异性单抗的阻断实验，发现了LAIRq和LAIR2识别的表位不同。其中，2A9能够同时阻断LAIR－l禾 LAIR－二与即－CAM结合，2D5、2D7和2H6只选择性地阻断＊川L1与即（＊M结合，3＊6能够显著提高＊M凡2与Ep＊＊M结合的亲和力。通过LAIR上和LAIR上分别与即cAM结合后，再加入LAIR1和 LAIR2 HRP标记的单抗，发现 FMUg可阻断即－C删和 LAIR刁的结合。＊＊ffeZ能够阻断L＊1＊上和Ep＊AM的作用，而＊＊1＊1只能够部分阻断＊人丑2和Ep＊AM的结合。 ＊川R家族分于和Ep＊AM都是即将命名＊D编号的候选分子，对它们的结构以及功能的研究，必将为2004年召开的第八届人类白细胞分化抗原会议中申请到新的CD编号打下基础。