DKK-1在颞下颌关节骨关节病中的作用

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第一部分DKK-1蛋白在骨关节病滑膜中的表达目的:DKK-1在肿瘤、风湿性关节炎等病理过程均发挥着重要作用,本部分研究目的在于探究DKK-1在颞下颌关节骨关节病滑膜中的表达。方法:利用免疫组织化学分别检测DKK-1在颞下颌关节骨关节病滑膜中的表达水平;结果:多数颞下颌关节滑膜组织中均可检测到DKK-1。正常组及骨关节病组的DKK-1的表达部位无明显区别,均表现为胞质和胞核的染色,并且在间质区域亦有稍浅的染色。在染色强度上,骨关节病组的滑膜呈现出明显的颜色加深。骨关节病组深棕色染色,细胞染色多而广泛,而正常滑膜组染色浅,部分细胞不染色。在大血管及新生小血管周围DKK-1表达尤为加强。经统计学分析,骨关节病组DKK-1表达明显强于正常滑膜组。结论:DKK-1蛋白在颞下颌关节骨关节病滑膜中高表达。第二部分DKK-1及VEGF蛋白在颞下颌关节紊乱病关节滑液中表达的表达目的:颞下颌关节滑液中蛋白含量的变化反应了滑膜细胞病理、生理状况。本部分研究目的在于检测颞下颌关节滑液中DKK-1和VEGF的含量,并分析它们的相关性。方法:抽取正常志愿者、颞下颌关节盘移位、骨关节病患者的滑液,利用ELISA检测颞下颌关节滑液中DKK-1及VEGF的含量。结果:DKK-1及VEGF蛋白在颞下颌关节病滑液中高表达,在骨关节病组DKK-1、VEGF的表达水平最高,不可复性关节盘前移位次之,而可复性关节病组在患者人群中DKK-1表达最低,通过相关性分析,DKK-1与VEGF之间的表达呈正相关性结论:DKK-1及VEGF蛋白在颞下颌关节病关节滑液中高表达。DKK-1高表达可能与颞下颌关节病血管生成有关第三部分DKK-1在颞下颌关节滑膜细胞中的表达及作用机制目的:本部分研究目的在于通过颞下颌关节滑膜细胞原代培养,在体外环境中检测DKK-1对于VEGF表达的影响及其机制方法:对炎性环境下颞下颌关节滑膜细胞DKK-1表达进行检测,并分析封闭DKK-1及给予外源性DKK-1后VEGF的表达,采用HIF-1α siRNA干扰后检测外源性DKK-1对VEGF表达的影响。利用条件培养基检测DKK-1对血管内皮细胞系迁移和成管能力的影响。结果:炎性环境中DKK-1及VEGF在颞下颌关节滑膜细胞中表达增加,颞下颌关节滑膜细胞中DKK-1通过上调HIF-1a来调控VEGF的表达,DKK-1对脐静脉内皮细胞HUVECs迁移、成管能力具有上调的作用结论:DKK-1参与调控颞下颌关节滑膜细胞VEGF的表达,并可能与滑膜炎症血管生成有关。
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