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目的: 本研究基于IL-22介导的角质形成细胞中miRNAs及mRNAs的差异表达，在miRNA及mRNA表达谱芯片前期研究的基础上，检测miR-548a-3p对角质形成细胞的生物学功能及其靶基因，进而从表观遗传学角度进一步探究IL-22诱导下microRNA对角质形成细胞增殖作用的分子机制。 方法: (1)将人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞株）分为实验组和对照组，分别给予100ng/ml的IL-22刺激24h和零刺激，实验重复3次。而后使用RNAisoPlus试剂提取细胞总RNA，并检测其浓度和纯度，以确保可在此后实验中使用; (2)从表达谱芯片结果中选取某目标差异miRNA，并选择U6为内参照，对此目标差异miRNA的芯片结果，通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法进行验证，以2-△△Ct法计算数据相对表达量，分别进行3次独立实验;根据入选标准，选择6例寻常型银屑病患者及6例正常人对照，分别对其皮损和皮肤组织样本，采用RT-qPCR法进行miRNA的分子表达检测，同样用2-△△Ct法表示; (3)向HaCaT细胞中，分别加入模拟物、抑制物、模拟物和抑制物的阴性对照进行转染，并实施CCK-8细胞增殖实验，以便验证该差异miRNA分子对人类角质形成细胞的生物学功能; (4)为筛选该miRNA可能调控的下游靶基因，首先对比miRNA芯片及mRNA芯片结果，取其中呈负相关的交集基因，而后查阅文献，并利用生物信息学数据库软件进行预测，综合以上结果筛选该miRNA的下游靶基因。双荧光素酶报告基因实验对筛选出的靶基因进行验证，通过检测萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的发光比值，以判断差异miRNA及其预测靶基因的mRNA3UTR端间是否发生了互补结合; (5)通过Western Blot实验检测差异miRNA过表达后靶基因蛋白的表达情况，对6例寻常型银屑病患者及6例正常人对照，分别将其皮损和正常皮肤组织制作为石蜡切片，采用免疫组织化学染色法检测该靶基因的表达情况，以确认靶基因蛋白是否对角质形成细胞具有功能。 结果: (1)miRNA及mRNA表达谱芯片结果表明:表达差异2倍及以上的miRNA共20个，其中表达上调的miRNA共15个，表达下调的miRNA共5个，选定miRNA-548a-3p作为下一步的实验对象，预测miR-548a-3p的靶基因共39个; (2)RT-qPCR结果表明:IL-22刺激HaCaT细胞24h后可使miR-548a-3p表达水平显著上调约17.91倍，明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），也可使6例寻常型银屑病患者皮损中miR-548a-3p表达水平显著上调约7.63倍，差异有统计学意义（P＜0.05）; (3)CCK-8细胞增殖实验结果显示:转染miR-548a-3p模拟物组，HaCaT细胞增殖能力较对照组明显增强，差异有统计学意义(P＜0.05)，而转染miR-548a-3p抑制物组，其细胞增殖能力较对照组明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）; (4)双荧光素酶报告基因实验验证靶基因PPP3R1结果显示:首先构建分别携带PPP3R1基因3UTR区野生型或突变型的报告基因载体，按照野生型+miR-548a-3p模拟物、野生型+miR-548a-3p对照物、突变型+miR-548a-3p模拟物、突变型+miR-548a-3p对照物的分组对HaCaT细胞进行共转染，结果发现，转染PPP3R1野生型报告基因载体及miR-548a-3p模拟物组，其荧光素酶活性显著低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，而转染突变型报告基因载体与miR-548a-3p模拟物组，其荧光素酶活性较对照组未见明显变化，差异无统计学意义(P＞0.05); (5)靶基因表达验证显示:参考生物信息学分析结果及相关文献，将PPP3R1判定为下游靶基因进行验证。免疫组织化学染色结果表明，6例寻常型银屑病患者皮损中Calcineurin B（PPP3R1所编码的蛋白）表达水平降低，明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）; (6)Western Blot法验证靶基因PPP3R1蛋白表达结果显示:转染miR-548a-3p模拟物组，CalcineurinB蛋白与对照组比较表达量显著降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。以上结果提示PPP3R1可能是miR-548a-3p的直接靶基因。 结论: 1.经IL-22刺激后，miR-548a-3p在角质形成细胞中表达水平上调，在寻常型银屑病患者皮损中同样显示表达水平提高; 2.miR-548a-3p过表达能够明显促进HaCaT细胞增殖; 3.PPP3R1很可能是miR-548a-3p的下游靶基因，miR-548a-3p可能通过调控Calcineurin B蛋白发挥促进角质形成细胞增殖的作用。