ETS 家族是一类转录因子,在组织的变异、淋巴组织的增生、侵袭和血管生成等方面发挥作用。ETS 发挥作用时与其联合蛋白(associated proteins)密切相关。本文研究了一种 ETS 家族成员—ETS1 及其联合蛋白 II(EAPII)相互作用促进宫颈癌转移的机制。 目的:通过在基因水平和蛋白水平上对 ETS1、EAPII 的研究,探讨各类宫颈病变中 ETS1、EAPII 的表达,特别是在宫颈癌的发生、进展中,两者的各自表达作用机制以及相关性。尝试阐明EAPII对ETS1转录活性的调控机制,为宫颈癌的诊断和治疗提供理论基础。 方法:本研究应用分子生物学的技术和方法,采用总 RNA 的提取,设计合成引物进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),扩增两个研究片段:ETS1 和EAPII。结果证明,在不同宫颈的组织中:从 mRNA 水平来看,两者具有相互 抑制性表达。接着,我们应用蛋白质印迹法(Western-blotting),分析蛋白水平上 ETS1 在不同宫颈组织中的表达量。最后,通过凝胶滞留电泳(EMSA),应用探针标记技术,研究了蛋白、DNA 结合的相互作用,在转录水平进一步揭示了 EAPII 对 ETS1 结合 DNA 能力的调控作用。 结果:本课题对在不同分型宫颈组织中 ETS1 和 EAPII 的表达进行测定,RT-PCR 结果显示:随着向宫颈癌进展,ETS1 的表达量逐渐增加,p<0.05。且在淋转的宫颈癌中比未发生淋转的宫颈癌表达高,p<0.01。证明了 ETS1 与肿瘤浸润和转移有一定的关系。而 EAPIImRNA 的表达随宫颈癌进展呈逐渐降低,p<0.05。说明 EAPII 否定地调整了 ETS1 的转录活性。Western-blotting 结果显示与 mRNA 水平表达一致。EMSA 结果显示:随着向宫颈癌进展,ETS1结合 DNA 的 能力增强,而 EAPII 抑制其结合能力。可见 EAPII 是一个新的ETS1 调节者。它调节了 ETS1 功能的特殊方面,而它们之间的进一步作用尚需用其它实验方法进行验证。