耐氟喹诺酮类药物乳酸菌中耐药因子的检测

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hamainini
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本研究以内蒙古四子王旗和达茂旗牧区自然发酵乳制品中分离得到的18株乳酸菌为研究对象,经生理生化鉴定菌株M23, M31, M35, M46, M47, M49, M50, B13, B18,B21, B28, B39及B97符合乳杆菌属的特性。菌株M22, M33, B4, B26和M41符合乳酸肠球菌属的生物学特性。选取7株试验菌株对其进行种的生理生化鉴定及16SrRNA序列分析得知,菌株M35为植物乳杆菌,M50为约氏乳杆菌,M22和M33为坚强肠球菌,M41,B4,B26为屎肠球菌。采用二倍稀释法,测定了目前临床常用的3种氟喹诺酮类药物(左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星)对这18株乳酸菌的药物最低抑菌浓度(MIC),结果表明菌株M22对三种抗生素均表现为中介,其余菌株对三种抗生素都表现为不同程度的耐药,并且耐药率高达94.4%。对7株耐药菌株提取质粒和质粒抗性基因qnr并电泳分析是否存在质粒和基因qnr,结果表明除菌株M50没有检测到质粒DNA外,6株不同试验菌株均检测出大约10kb左右的质粒DNA可疑带,且6株试验菌株均未检测到质粒抗性基因qnr。对含质粒的菌株进行质粒重组并对7株耐药菌株进行耐药因子的提取及转化,然后对重组菌株和转化后的菌株进行药敏性检测。结果表明,耐药菌株的重组质粒对三种抗生素均表现为敏感,相反,耐药菌株的转化因子表现为不同程度的耐药。即耐氟喹诺酮类药物乳酸菌的质粒与耐药性无直接关系,耐药性不会通过质粒进行传播,但耐药性可通过除质粒qnr基因之外的耐药因子进行传播。
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