【摘 要】
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目的:脊髓缺血/再灌注损伤(SpinalCordIschemia/reperfusionInjury,SCII)是与胸腹主动脉瘤等心血管大手术相关的一种继发性损伤。脊髓缺血/再灌注损引起的神经炎症和细胞凋亡可导致神经功能障碍。近年来,MicroRNAs(miRs)在脊髓缺血/再灌注损伤的发病机制起至关重要作用。本研究拟探索miR-128-3p是否通过调控SP1(Sp
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目的:脊髓缺血/再灌注损伤(SpinalCordIschemia/reperfusionInjury,SCII)是与胸腹主动脉瘤等心血管大手术相关的一种继发性损伤。脊髓缺血/再灌注损引起的神经炎症和细胞凋亡可导致神经功能障碍。近年来,MicroRNAs(miRs)在脊髓缺血/再灌注损伤的发病机制起至关重要作用。本研究拟探索miR-128-3p是否通过调控SP1(SpecificityProtein1)参与SCII的过程。研究方法:通过阻断主动脉弓血流14分钟建立大鼠SCII模型。采用双荧光素酶报告基因检测miR-128-3p与SP1的靶向结合关系。通过鞘内注射miR-128-3pmimic、inhibitor和AV-sh-SP1,以评估miR-128-3p和SP1对大鼠脊髓缺血/再灌注损伤的影响。通过Westernblot检测SCII后大鼠脊髓中SP1、Bax和Bcl-2的表达水平。通过ELISA定量检测IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。采用Tarlov评分法对大鼠进行行为学测试,HE染色法评价脊髓SCII后组织病理学变化。采用伊文思蓝(EB)染料外渗法检测血脊髓屏障(Blood-spinalcordbarrier,BSCB)通透性。采用TUNEL染色检测各组细胞凋亡情况。结果:与Sham组相比,I/R组的SP1表达明显升高而miR-128-3p的表达明显降低。SP1是miR-128-3p的靶蛋白,且miR-128-3p可以抑制SP1的表达。过表达miR-128-3p或者沉默SP1可以改善大鼠脊髓/缺血再灌注损伤后的下肢运动功能,减轻BSCB的通透性,降低炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的释放,缓解脊髓细胞凋亡情况,SP1和Bax的蛋白水平显著降低,而Bcl-2蛋白水平明显升高。抑制miR-128-3p可以加重脊髓损伤,而抑制miR-128-3p的同时沉默SP1则可以逆转这种损伤作用。结论:miR-128-3p通过靶向结合SP1抑制其表达水平,减轻SCII神经炎症和细胞凋亡。
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