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加压素是由垂体后叶分泌的激素,在肾脏通过提高集合管对水的通透性来调节水的排泄。梅尼埃病患者的血浆加压素水平显著增高。组织学研究证实,加压素可以引起动物膜迷路积水。但是加压素引起膜迷路积水的机制仍不十分清楚。一系列研究表明,加压素可能通过VP-V2R-AC-cAMP-AQP2,VP-AQPs和/或VP-cAMP-IC等方面影响内耳液体平衡,涉及复杂的多位点和多途径。因此,我们使用cDNA芯片研究加压素对大鼠内耳基因表达谱的影响,并使用RT-PCR技术研究加压素对大鼠内耳水通道蛋白基因表达的影响,探讨加压素引起膜迷路积水的发生机制及其水通道的作用。 目的 1.研究加压素对大鼠内耳基因表达谱的影响,探讨加压素引起膜迷路积水的发生机制。 2.研究加压素对大鼠内耳水通道蛋白基因表达的影响,探讨加压素引起膜迷路积水的发生机制中水通道的作用。 方法 1.大鼠腹腔注射精氨酸加压素,50μg/kg,每天1次,共1周;然后取出听泡,提取内耳总RNA。 2.使用大鼠BiostarR-40s cDNA芯片技术:将内耳mRNA逆转录成cDNA并标记,然后和cDNA芯片杂交,经过数据分析,显示加压素注射前后大鼠内耳mRNA表达强度变化。 3.使用RT-PCR技术:测量加压素注射前后大鼠内耳AQP2和AQP7 mRNA表达水平变化。 结果 1.cDNA芯片实验筛选出加压素腹腔注射后大鼠内耳有差异表达的已知基因共226条,其中高表达基因125条,低表达基因101条;有显著差异表达上调(Ratio>5)的已知基因18条,有显著差异表达下调(Ratio<0.2)的已知基因7条;和细胞信号转导有关的差异表达基因10条,和离子转运有关的差异表达基因14条,和囊泡介导转运有关的差异表达基因7条,和水通道有关的差异表达