真核延伸因子-1A2基因在宫颈癌侵袭和迁移中的作用研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanghua_it
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目的:探讨真核延伸因子-1A2(e EF1A2)基因对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。探讨e EF1A2基因表达变化与EMT相关分子E-cadherin、vimentin、fibronectin表达关系。方法:基因表达谱交互式分析2(Gene expression profile interactive analysis 2,GEPIA2),是基于TCGA和GTEx的肿瘤分析数据库,可用于分析e EF1A2基因在宫颈癌中表达情况。实时荧光定量PCR方法检测宫颈癌组织和慢性宫颈炎组织中e EF1A2基因拷贝数。设计e EF1A2基因的si RNA干扰片段,分别转染宫颈癌Si Ha、He La和C33A细胞。采用Western blot方法检测e EF1A2基因和E-cadherin、vimentin、fibronectin在宫颈癌细胞中蛋白表达水平。划痕实验和基质胶包被transwell实验分析e EF1A2的表达对宫颈癌细胞侵袭和迁移的影响。分别通过CCK-8增殖实验、平板克隆和流式细胞术,检测e EF1A2的表达变化对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。结果:生物信息学分析发现eEF1A2基因在乳腺癌、胰腺癌组织高表达。通过实时荧光定量PCR分析e EF1A2基因在宫颈癌和慢性宫颈炎组织拷贝数,两者差异无统计学意义。通过RNA干扰实验使宫颈癌Si Ha、He La和C33A细胞中e EF1A2表达水平降低,结果显示E-cadherin蛋白表达水平升高,vimentin、fibronectin蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示,si RNA干扰e EF1A2表达后的细胞(实验组)与对照组相比较,愈合间隙宽,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭、迁移实验显示,si RNA干扰的细胞与对照组相比,穿过小室基底膜的细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8增殖实验、细胞克隆形成实验结果显示,si RNA干扰e EF1A2表达后抑制宫颈癌细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术结果显示,si RNA干扰的细胞与对照组相比细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:e EF1A2基因在宫颈癌组织中高表达。e EF1A2基因在宫颈癌增殖、侵袭和迁移中均发挥重要作用,干扰e EF1A2基因表达显著抑制宫颈癌细胞增殖。e EF1A2基因影响EMT相关分子表达,E-cadherin蛋白表达水平升高,vimentin、fibronectin蛋白表达水平降低,可以抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移。
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