微生物菌肥菌种分离、鉴定及混合发酵

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本实验从多种市售微生物肥料、植物根际土壤中进行微生物菌种分离筛选与鉴定,并将分离得到有效菌株进行了共同培养,以便开发具有多种功能的新型复合微生物菌肥。实验分离菌种90株,其中芽孢细菌66株,厌氧芽孢细菌1株,乳酸菌8株,酵母菌5株,片球菌1株,假单胞菌2株,放线菌1株,霉菌6株。通过解磷、解钾、固氮实验以及16S r DNA分子鉴定,从中筛选出9株细菌:解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、恶臭假单胞杆菌(Pseudomonas putida)、布氏乳酸杆菌(Lactobacillus buchneri),2株酵母菌:酿酒酵母(Saccharomvces cerevisiae)、产朊假丝酵母(Candida utilis)3株霉菌作为混合培养的菌株。通过多菌株混合培养基的筛选,得到一种适合五种芽孢细菌生长的复合培养基配方:硫酸铵2g葡萄糖3g马铃薯淀粉7g磷酸氢二钾0.3g氯化钠0.2g硫酸镁0.8g硫酸锰0.03g硫酸亚铁0.03g酵母粉3g蒸馏水1000ml PH7.0,并采用镜检和变性梯度凝胶电泳实验进行了检测。并以该培养基为基础,进行乳酸菌、酵母菌和霉菌的复合发酵实验,为微生物菌肥固体发酵提供种子液。选用两种不同配方进行微生物菌肥固体发酵实验,并对发酵产品菌数、有机质含量、总养分(N+P2O5+K2O)含量进行检测,结果发现用鸡粪、稻壳和腐植酸为原料经微生物菌种发酵后,产品质量优于微生物菌肥国家标准。
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