【摘 要】
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以热带假丝酵母QZA0201为出发菌株,经自然分离,得到一株含RNA(占干菌重4.16﹪)和乳糖酶(2.01U/g湿菌)的菌株QZN0209.分别通过产RNA培养基和培养条件,乳糖酶诱导条件的优化,使摇瓶最
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以热带假丝酵母QZA0201为出发菌株,经自然分离,得到一株含RNA(占干菌重4.16﹪)和乳糖酶(2.01U/g湿菌)的菌株QZN0209.分别通过产RNA培养基和培养条件,乳糖酶诱导条件的优化,使摇瓶最高产量达到:RNA 13.94﹪(提高2.35倍),乳糖酶10.60U/g湿菌(提高4.27倍),菌体干重12.2g/L(湿重60.8g/L).采用5升发酵罐,主要通过发酵过程溶氧、pH、碳源流加以及补料的控制,提高RNA和乳糖酶的罐产量,使其稳定在摇瓶水平,分别达到12.62﹪和10.42U/g湿菌.通过比较菌体细胞的不同破壁方法和改变甲苯处理菌体条件的实验,确立了先后用1﹪和5﹪的甲苯处理菌体可将大部分RNA和乳糖酶分离的方法.最后通过超滤法和加入核酸沉淀剂分别纯化RNA和乳糖酶,得到RNA沉淀(占干菌重7.73﹪)和乳糖酶浓缩液(5.37U/mL).RNA纯化平均总收率为60.2﹪,乳糖酶为86.3﹪.
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